[发明专利]一种植物DNA的快速提取方法在审
| 申请号： | 202010051044.2 | 申请日： | 2020-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN111100861A | 公开（公告）日： | 2020-05-05 |
| 发明（设计）人： | 杨美青 | 申请（专利权）人： | 杨美青 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 张雪 |
| 地址： | 014060 内蒙*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 植物 dna 快速 提取 方法 | ||
1.一种植物DNA的快速提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜植物组织研磨成匀浆；
步骤2：向匀浆中加入改良裂解液，离心，获取上清液；所述改良裂解液包含以下组分：Tris-HCl、NaCl溶液、EDTA溶液、PVP以及改性活性炭；
步骤3：向上清液中加入95％乙醇溶液，离心获取沉淀；
步骤4：用75％乙醇溶液进行洗涤沉淀，得到纯品DNA。
2.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤1中在液氮环境中进行研磨。
3.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤2中，Tris-HCl100moL/L pH8.0，NaCl溶液0.5moL/L，EDTA溶液20moL/L，PVP 0.5％以及改性活性炭0.5-1％。
4.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤2中所述改良裂解液加入所述匀浆前，先在40-50℃条件下预热15-20min。
5.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤2中离心方式为：先在20℃、2000-4000rpm离心2-3min，再于20℃、6000-8000rpm离心15-20min。
6.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤2中匀浆和所述改良裂解液按质量体积比1:15-20混合。
7.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，所述改性活性碳是由以下方法制备：将活性炭和硝酸溶液按质量体积比1：3-4混合，回流4-5h，再用水洗涤，置于烘箱中干燥得到改性活性炭。
8.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，所述硝酸的体积分数为10％；回流温度为40-50℃；在110℃烘干处理8-10h。
9.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤3中离心速度为4000-5000rpm，离心时间15-20min。
10.如权利要求1所述的植物DNA的快速提取方法，其特征在于，步骤4中75％的乙醇溶液提前预冷至4℃，再洗涤3-5次，置于-20℃保存。
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