[发明专利]一种结核分枝杆菌核酸适配子及其制备方法在审
申请号: | 202010051901.9 | 申请日: | 2020-01-17 |
公开(公告)号: | CN111218449A | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 吴燕玲;冀俊峰;邹国源 | 申请(专利权)人: | 上海孚清生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10 |
代理公司: | 合肥东邦滋原专利代理事务所(普通合伙) 34155 | 代理人: | 张海燕 |
地址: | 201601 上海市松江区漕河泾开发*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 结核 分枝杆菌 核酸 配子 及其 制备 方法 | ||
1.一种结核分枝杆菌核酸适配子,其特征在于:通过SELEX筛选方法得到结核分枝杆菌特异亲和的适配子,其核苷酸序列SEQ ID NO:0所示。
2.根据权利要求1所述的结核分枝杆菌核酸适配子,其特征在于:对其进行结构改造,筛选出SEQ ID NO:2-3。
3.权利要求1所述的结核分枝杆菌核酸适配子的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,
通过构建单链寡核苷酸文库,利用SELEX技术筛选H37Rv适配子,筛选后的饱和文库,经克隆测序,获得单个适配子SEQ ID NO:0;对获得的单个适配子SEQ ID NO:0进行结构改造,获得4个序列与二级结构均不同的适配子,SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQID NO:4;对4个适配子进行灵敏度检测,对灵敏度最高的适配子SEQ ID NO:2进行二次改造,获得4个序列与二级结构均不同的适配子SEQ ID NO:2-1、SEQ ID NO:2-2、SEQ ID NO:2-3、SEQ ID NO:2-4,检测其对结核分枝杆菌标准株H37Rv结合的灵敏度与特异性,获得2个灵敏度和特异性均良好的适配子SEQ ID NO:2-2、SEQ ID NO:2-3,用于临床痰液样本中结核分枝杆菌的检测,获得灵敏度最高的适配子SEQ ID NO:2-3。
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