[发明专利]一种藤苦参组织培养方法

权利要求书

1.一种藤苦参组织培养方法，其特征在于，包括下述步骤：

1)外植体灭菌：将藤苦参果荚进行预处理，取出果荚中的种子，消毒，备用；

对藤苦参果荚进行预处理并对种子进行消毒的过程包括：

11)以无菌水对藤苦参果荚进冲洗3次，每次1-2分钟；

12)取出藤苦参果荚中的种子，以75％酒精浸泡种子20-30s，然后以无菌水对种子冲洗3次，每次1-2分钟；

13)用0.1％升汞浸泡经步骤12)处理后的种子10-15min，然后用无菌水冲洗4～5次，每次1分钟，备用；

2)种子萌发培养：将步骤1)中消毒后的种子接种于添加有0.8-2.0mg/L 6-BA、0.2-0.5mg/L NAA和1 g/L活性炭的MS培养基中进行萌发培养，20-25d后，得到藤苦参幼芽；

3)丛生芽分化培养：将步骤2)所得藤苦参幼芽接种于添加有3.0-4.0mg/L 6-BA和0.2-0.5mg/L NAA的MS培养基中进行分化培养，35-45d后得到藤苦参分化芽；

4)生根壮苗培养：待步骤3)中的藤苦参分化芽长成3-4cm幼苗时，将其转接到添加有1.0mg/L NAA和1 g/L活性炭的MS培养基中进行生根壮苗培养，45-55d后，得到生根幼苗；

5)炼苗及定植：将步骤4)得到的生根幼苗置于自然光下培养3天，打开试管苗瓶盖炼苗3天，然后用镊子轻轻夹出试管苗，洗去基部的琼脂，移栽到添加了1/2MS营养液的砂土中，4周后移栽至土壤中，进行定植。

2.根据权利要求1所述的一种藤苦参组织培养方法，其特征在于，步骤2)-4)中，培养室温度为23-27℃、光照强度为1000-1200lx，光照时间12-14h/天。

3.根据权利要求1所述的一种藤苦参组织培养方法，其特征在于，步骤2)-4)中，MS培养基的pH值控制为6.2-6.7。