[发明专利]一种人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒、构建方法及应用有效
| 申请号： | 202010055543.9 | 申请日： | 2020-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN111235118B | 公开（公告）日： | 2020-11-24 |
| 发明（设计）人： | 张其威;严雨茜;吴建国;谭秋萍 | 申请（专利权）人： | 广东龙帆生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;A61K39/235;A61P31/20 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 528315 广东省佛山市顺德区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 复制 缺陷 重组 构建 方法 应用 | ||
1.一种人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒，其特征在于：所述人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒以人5型复制缺陷型的腺病毒pAdEasy-1为载体，所述人5型复制缺陷型的腺病毒的基因组缺失部分E1区和E3区基因，且在E1区位置插入了人3型腺病毒六邻体完整基因，并在AD293细胞中包装得到重组病毒。
2.根据权利要求1所述的一种人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒，其特征在于：所述人3型腺病毒六邻体完整基因的核苷酸序列见SEQ ID NO.3。
3.一种如权利要求1或2所述的人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒的制备方法，其特征在于，包括：将含有人3型腺病毒六邻体完整基因的穿梭质粒pShuttle-CMV-GFP质粒与腺病毒骨架质粒在细菌内同源重组，得到的重组腺病毒载体在AD293细胞中包装获得该重组腺病毒疫苗；所述腺病毒骨架质粒为缺失部分E1区和E3区基因的人5型腺病毒载体pAdEasy-1。
4.根据权利要求3所述的人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒的制备方法，其特征在于，包括：将SEQ ID NO.3所示的3型腺病毒六邻体完整基因片段克隆至穿梭质粒，获得质粒pSAd3H；将pSAd3H与人5型腺病毒载体骨架质粒转化入可表达重组酶的大肠杆菌，利用两质粒同源臂进行同源重组，获得3型腺病毒重组载体prAd3H；
将线性化后prAd3H转染入AD293包装出人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒颗粒。
5.根据权利要求4所述的人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒的制备方法，其特征在于：所述可表达重组酶的大肠杆菌为大肠杆菌BJ5183。
6.如权利要求4-5任一所述的人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒的制备方法在制备人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒中的应用。
7.如权利要求1或2所述的人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒在制备治疗或预防3型腺病毒感染疾病的药物或疫苗中的应用。
8.根据权利要求7所述的人3型腺病毒复制缺陷型重组病毒在制备治疗或预防3型腺病毒感染疾病的药物或疫苗中的应用，其特征在于：所述药物或疫苗的剂型为注射剂、滴鼻剂。
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