[发明专利]一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针及检测方法

权利要求书

1.一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针，其特征在于，所述探针命名为AV4143P1，核苷酸序列为5’-AGATGGTTCTGCTATCGCTTT-3’；SEQ ID NO.1；

所述5’端使用6FAM作为荧光基团，所述3’端使用BHQ1作为淬灭基团。

2.一种利用权利要求1所述探针检测禽类粪便污染的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)提取样本DNA；

(2)采用荧光定量PCR方法进行检测；

反应体系如下：

10μL 2X TaqMan Environmental MasterMix 2.0、终浓度为500nM的上游引物AV4143F、终浓度为500nM的下游引物AV4143R、终浓度为250nM的AV4143P1、2μL的DNA模板，加无菌水至20μL；

所述上游引物AV4143F的核苷酸序列为5’-TGCAAGTCGAACGAGGATTTCT-3’；SEQ IDNO.2；所述下游引物AV4143R的核苷酸序列为5’-TCACCTTGGTAGGCCGTTACC-3’；SEQ IDNO.3；

反应条件如下：

50℃预变性2min；95℃预变性10min；95℃变性15s；60℃退火和延伸1min，共40个循环。