[发明专利]一种利用线粒体分子标记鉴定柑橘潜叶蛾的方法在审
申请号: | 202010056887.1 | 申请日: | 2020-01-16 |
公开(公告)号: | CN111118175A | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
发明(设计)人: | 刘虹伶;刘旭;陈庆东;陈松;蒲德强;刘月悦;李超;陈倩颖;陈圆;杨明;雷应华;易春燕;张翠翠 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 张雪 |
地址: | 610066 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 线粒体 分子 标记 鉴定 柑橘 潜叶蛾 方法 | ||
1.一种用于鉴定柑橘潜叶蛾的线粒体分子标记,其特征在于,包括以下引物:
F:5’-ATTGCCCACGGTGGTAGATC-3’;
R:5’-ACTGCTCCTATGGAAAGAACGT-3’。
2.一种利用线粒体分子标记鉴定柑橘潜叶蛾的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取供试样品中的DNA;
(2)采用权利要求1所述的线粒体分子标记对供试样品的模板DNA进行PCR,获取PCR扩增产物;
(3)对所得PCR扩增产物进行凝胶电泳,对电泳检测结果通过分析基本核心SSR结果,确定供试样品的品种。
3.根据权利要求2所述的利用线粒体分子标记鉴定柑橘潜叶蛾的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述供试样品为来自于江苏、福建、浙江、海南、广西、广东、湖南、湖北、贵州、四川、重庆不同地区的柑橘潜叶蛾。
4.根据权利要求2所述的利用线粒体分子标记鉴定柑橘潜叶蛾的方法,其特征在于,步骤(2)中,扩增体系20μL,包括:5×FastPfuBuffer 4μL、2.5mMdNTPs 2μL、5μM引物各0.8μL、DNA聚合酶0.4μL、DNA模板10ng,加水补充至20μL;
扩增程序:95℃5min,95℃30s,55℃30s,72℃45s,35个循环;72℃10min,10℃保存。
5.根据权利要求2所述的利用线粒体分子标记鉴定柑橘潜叶蛾的方法,其特征在于,步骤(3)中,采用2%琼脂糖凝胶电泳进行检测。
6.一种权利要求1所述的线粒体分子标记在辅助柑橘潜叶蛾鉴定、D NA指纹图谱构建及遗传多样性评价与系统发育研究中的应用。
7.一种权利要求2-5任一项所述的方法在辅助柑橘潜叶蛾鉴定、DN A指纹图谱构建及遗传多样性评价与系统发育研究中的应用。
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