[发明专利]一种预防兔耳痤疮的ADSCs条件培养基及制备方法

说明书

本发明属于培养基制备技术领域，公开了一种预防兔耳痤疮的ADSCs条件培养基及制备方法，脂肪组织采集；ADSCs培养；制备A‑CM；制备无培养基ADSCs培养上清；制备CM‑透明质酸混合液；流式细胞术分析；利用ELISA法检测A‑CM中生物活性分子。实验表明，A‑CM和Fr‑CM涂抹均能显著抑制粉刺、丘疹、脓包、溃烂和结节，并防止皮损部位累及周围组织，其预防效应与CM浓度呈正相关，是一种预防痤疮的新方法；而生理盐水培养ADSCs获得的FrA‑CM含有多种生物活性成分，不含完全培养基中复杂的生物和化学成分，且具有与A‑CM相似的预防痤疮的潜能，是一种能完全替代A‑CM的原料。

技术领域

本发明属于培养基制备技术领域，尤其涉及一种预防兔耳痤疮的ADSCs条 件培养基及制备方法。

背景技术

目前，最接近的现有技术：痤疮是常见的慢性炎症型皮肤疾病，多发于青 少年，临床表征为丘疹、粉刺、脓疱、囊肿以及结节，一般I度和II度痤疮可自 愈，至多局部外用维A类药物或抗生素即可，但III度及IV度痤疮经常会导致皮损， 即使及时采用外用-口服联合治疗，由于治疗周期较长，用药剂量较大，长期使 用耐药性明显，使得患者的治疗依从性较差，极容易引起色素沉着、持久性红 斑、凹陷性或肥厚性瘢痕等严重皮肤问题，严重影响患者心理健康和社交。2005 年日本长崎大学NakagawaH等报道，人间充质干细胞移植能加速创口收口和愈 合，降低疤痕纤维化程度，减小疤痕，促进角质层形成；2007年加拿大阿尔伯塔大学Wu.等发现间充质干细胞通过诱导真皮组织血管新生、重建组织结构、创 面上皮化过程，加速创口收口、缩小疤痕；2011年美国费城儿童医院的Mackenzie 等发现，在创口愈合和组织修复过程中，间质基质细胞起到了重要作用。既往 的研究表明，干细胞移植的作用方式可能并不是通过外源细胞再生修复起作用 的，而是通过干细胞分泌的生物活性物质诱导机体的固有修复能力起作用。近 期有几个研究也证明，脂肪干细胞(ADSC)条件培养基(A-CM)中含有多种 生物活性分子，具有抑制炎症、调节免疫细胞活性、促进间质细胞增殖和胶原 分泌、减少肌纤维化、促进微血管网络新生和再生、调节毛囊周期等生理活性，对于皮肤损伤、炎症、毛囊脂肪代谢失调有一定的治疗效果。另外的研究证明 间充质干细胞具有抑制痤疮丙酸杆菌的作用。但既往干细胞治疗痤疮的实验研 究集中在干细胞或其条件培养基修复痤疮所带来的组织损伤、色素沉着方面。 本发明拟以脂肪干细胞条件培养基预防痤疮的发生，为研究其中可能的机制奠 定基础。