[发明专利]一种提高两性霉素B产量的补料控制发酵方法

权利要求书

1.一种提高两性霉素B产量的补料控制发酵方法，所述方法包括：将结节链霉菌CCTCCNO：M 2017426接种至种子培养基，获得种子液；种子液接种至发酵培养基，进行发酵培养，发酵总时间120±36小时，所述发酵培养基组成如下：葡萄糖60~80 g/L，棉籽粉10~30 g/L，碳酸钙5~15 g/L，磷酸二氢钾0.05~5 g/L，溶剂为水，自然pH值；发酵过程中参数控制如下：

（1）控制发酵体系pH维持在6.0~7.5，直至发酵结束；

（2）在发酵培养第0~48h，维持温度在30±3℃，当发酵至48h时，将温度降至26±3℃，维持该温度直至发酵结束；

（3）发酵前期使菌体在自然DO条件下生长，当发酵体系DO值下降至5~50%时，控制DO值维持在5%~50%至108h，后恢复自然DO值直至发酵结束；

（4）控制发酵培养基中葡萄糖浓度，发酵过程中葡糖糖浓度下降到20~40 g/L时，进行恒速补料，葡糖糖补料速率为0.1~5.0 g/L·h；

（5）在发酵第24h，补加5~15 mL/L丙酮酸、0.001~0.1 g/L烟酰胺、0.1~5 mmol/L丙氨酸和0.1~15 mg/L异丙醇四种混合外源添加物。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述种子培养基组成如下：蛋白胨10~30 g/L，酵母提取物5~20 g/L，氯化钠1~10 g/L，葡萄糖5~20 g/L，碳酸钙0.5~2 g/L，溶剂为水，pH为7.0~7.2。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于发酵过程中以质量浓度为30±2%的氨水或乙酸来控制pH值。