[发明专利]基于唾液特异糖蛋白糖链结构的肝纤维化筛查、评估的产品及应用

说明书

本发明公开了基于唾液特异糖蛋白糖链结构的肝纤维化相关筛查、评估的产品及应用，针对唾液样本，提供了用于肝纤维化筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估的产品，检测唾液样本中是否含有特定的18种N‑糖链之任一或任意组合。能够判断唾液样本主体是否为肝纤维化(HF)患者(而不是乙型肝炎患者)。相应的，起到特异性结合识别作用的凝集素为RCA120，能够单独作为识别唾液特异糖蛋白糖链结构的试剂用以制备相关医疗产品。

技术领域

本发明涉及一种基于唾液特异糖蛋白的肝纤维化标志物的确定及其相关产品、应用。

背景技术

我国是慢性肝炎特别是乙型肝炎的高流行区，约有1.2亿人长期携带乙肝病毒，慢性肝炎患者大约有3000万。约有30万慢性肝炎患者发展为肝硬化和肝癌患者。研究发现，80％-90％的肝癌患者经历“慢性肝炎－肝纤维化-肝硬化－肝癌”的过程。肝纤维化(Hepatic Fibrosis，HF)是临床常见的慢性进行性肝病。肝纤维化是一种可逆的病理学过程，如果肝纤维化不加以干预会在一定的时间内发展为肝硬化。在我国由于乙肝病毒引起的慢性肝炎是引起肝纤维化的主要原因。病理组织学上慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎以门静脉区-中央静脉区的纤维间隔形成为特征。随着各种慢性肝病的进展，肝脏病理进程可从早期的肝纤维化，继而发展为以纤维组织环绕增生肝细胞团硬化结节为特征的肝硬化。目前，肝纤维化的诊断以医学影像学技术为主，对设备以及人员要求较高，不便做为实时监控肝纤维化进程的技术手段。因此，寻求非损伤性检查，进行肝纤维化的早期诊断，有助于提前介入，减缓肝硬化的发展进程，这是预防肝癌的关键。

唾液是人体的体液之一，由三个主要的腺体分泌。唾液中蛋白质的来源于唾液腺分泌以及血液通过被动扩散以及主动运输至唾液中。唾液是一种十分理想的检测材料，具有取材方便，对患者无侵入性，可多次取样等优点。近些年的研究表明，唾液蛋白能够反映生理机能，并在一些疾病(诸如干燥综合症，囊胞性纤维症以及肿瘤等)的无损检测方面具有广阔的应用前景。虽然唾液中的蛋白质与血清中的蛋白质种类有一定的重合，但是在血液循环中的生物标志物并非都适用于唾液的检测。并且同一蛋白在血清和唾液之间的丰度上也存在着明显的差异。因此，在实际应用上针对这两种生物检测材料在检测方法和检测靶标等方面不尽相同。

发明内容

关于肝纤维化(Hepatic Fibrosis,HF)的筛查、诊断以及评估等，发明人通过大量实验和分析，确定了以下结论：

一、RCA120识别的糖链(β-Gal/GalNAc,Galβ-1,3/4GlcNAc)在肝纤维化(HF)患者的唾液中的相对丰度低于乙型肝炎(HB)患者组(HB组77.12％，HF组65.63％)。

二、18种N-糖链(m/z.1581.485；1590.565；1622.555；1688.613；1704.608；1721.556；1812.6891834.671；1883.566；1938.682；1949.71；2110.767；2732.951；2873.046；2920.036；2991.036；3074.11；3188.115；3577.258)仅存在于HF患者的唾液中，而未见于HB患者的唾液中。

根据以上结论，已经可得出以下应用方案：

第一方面，一种凝集素单独作为唾液特异糖蛋白糖链结构识别的试剂以构建相关产品的用途，所述凝集素为RCA120，用途为肝纤维化(HF)患者的筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估，所述相关产品为试剂盒、设备、可操作系统和/或它们的组合。

进一步地，所述相关产品还提示以下检测依据：

凝集素RCA120所识别的N-糖链中如果存在以下18种N-糖链之任一或任意组合，则表明唾液样本主体为肝纤维化(HF)患者，而不是乙型肝炎(HB)患者；

(1)m/z.1581.485(2.66％)；