[发明专利]一种用于分离临床样本中的糖基化外泌体的凝集素-大分子载体偶联复合物

权利要求书

1.一种用于分离临床样本中的糖基化外泌体的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，包括：大分子载体；和偶联在大分子载体外侧的凝集素；其中：

所述凝集素包括：木菠萝凝集素、花生凝集素、豌豆凝集素、刀豆凝集素、小扁豆凝集素、麦胚素、大豆凝集素、芸豆凝集素、蜗牛凝集素中的任意一种或者两种及以上；

所述大分子载体包括葡聚糖微球、琼脂糖微球、树脂或环氧树脂微球、聚苯乙烯微球中的任意一种或者两种及以上；

所述大分子载体粒径分布范围为1μm-200μm；

所述凝集素-大分子载体偶联复合物中，每1ml大分子载体上偶联有5-15mg凝集素；

所述糖基化外泌体包括：N-糖基化外泌体、O-糖基化外泌体、岩藻糖基化外泌体的任意一种或两种及以上。

2.根据权利要求1所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，所述大分子载体粒径分布范围为10μm-200μm。

3.根据权利要求2所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，所述大分子载体粒径分布范围为30μm-150μm。

4.根据权利要求1至3任一所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，所述凝集素-大分子载体偶联复合物中，每1ml大分子载体上偶联有10-15mg凝集素。

5.根据权利要求1所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，所述临床样本包括：血清、血浆、唾液、组织或细胞培养上清液、尿液、脑脊液、淋巴液中的任意一种。

6.根据权利要求1所述凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，所述凝集素包括：木菠萝凝集素、花生凝集素、豌豆凝集素、刀豆凝集素、小扁豆凝集素、麦胚素、大豆凝集素、芸豆凝集素中的任意一种或者两种及以上。

7.根据权利要求1所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，所述凝集素-大分子载体偶联复合物保存液分装于包括亲和吸附离心管的分离装置中；所述亲和吸附离心管包括：上部离心管和外部保护套管两部分；所述上部离心管的直径小于外部保护套管的直径，所述上部离心管套设于外部保护套管内且在其上部外侧存在凸起的环形边缘或支柱用于支撑上部离心管的开口处高于外部保护套管；所述上部离心管包括离心管盖、离心管壁和与离心管壁固定连接的过滤膜底部，过滤膜底部所使用的过滤膜的孔径小于凝集素-大分子载体偶联复合物的粒径，同时大于外泌体的粒径，所述凝集素-大分子载体偶联复合物保存液保存于上部离心管中。

8.根据权利要求7所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，其特征在于，过滤膜孔径为150nm - 1000nm。

9.一种糖基化外泌体分离组合物，其特征在于，所述糖基化外泌体分离组合物包括：权利要求1-8之一所述的凝集素-大分子载体偶联复合物，还包括：用于清洗去除分离过程中非特异性结合的、未发生糖基化的外泌体及其他杂质的清洗液和用于洗脱特异性结合在凝集素-大分子载体偶联复合物上的糖基化外泌体的洗脱液；其中，

所述清洗液为无金属盐离子的清洗缓冲液或纯化水；

所述洗脱液为溶有糖的硼酸盐缓冲液。

10.根据权利要求9所述的糖基化外泌体分离组合物，其特征在于，所述清洗液为无金属盐粒子的清洗缓冲液。

11.根据权利要求9所述的糖基化外泌体分离组合物，其特征在于，所述洗脱液为溶有甘露糖的硼酸盐缓冲液。

12.根据权利要求11所述的糖基化外泌体分离组合物，其特征在于，所述溶有甘露糖的硼酸盐缓冲液包括10-20mM的硼酸盐缓冲液和溶于其中的100-500mM 的甘露糖。

13.根据权利要求9-12任一所述的糖基化外泌体分离组合物，其特征在于，所述洗脱液为pH值6 .5±0 .2的硼酸盐-甘露糖缓冲液。