[发明专利]一种具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖及其制备方法与应用。该方法包含如下步骤：将蛹虫草菌种接种于液体培养基中进行发酵培养，固液分离，得到蛹虫草发酵液和蛹虫草菌丝体；然后将菌丝体脱脂处理后采用热水浸提、浓缩，得到蛹虫草浸提浓缩液；再将蛹虫草发酵液和浸提浓缩液分别采用胰蛋白酶结合Sevage法除蛋白、乙醇沉淀、脱色后进行DEAE‑纤维素柱层析及交联Sephadex G‑100凝胶柱纯化，得到蛹虫草胞内多糖和胞外多糖。本发明方法制备的蛹虫草多糖均能够有效抑制巨噬细胞分泌NO，具有良好的抗炎作用，可将其用于抗炎药物或保健食品领域。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖及其制备方法与应用。

背景技术

通过食药用真菌液体深层发酵获得发酵液和菌丝体，一般可分别从菌丝体中提取胞内多糖和发酵液中提取胞外多糖。蛹虫草(Cordyceps militaris)，又被称为北虫草，北冬虫夏草，是一种典型的食药用的大型真菌，寄生在幼虫和蘑菇子实体上，其中含有虫草素、虫草酸、甾醇(麦角甾醇)、核苷和多糖等物质(Tuli,Hardeep S,Sharma,Anil K,Sandhu,Sardul S,et al.Cordycepin:A bioactive metabolite with therapeuticpotential[J].Life Sciences,2013,93(23):863-869.)具有极高的营养价值和药用价值。作为一种传统中药，蛹虫草根据其提取物的不同具有抗氧化(Cordyceps fungi:naturalproducts,pharmacological functions and developmental products[J].Journal ofPharmacyPharmacology,2010,61(3):279-291.)、免疫调节(Lull C,Wichers H J,Savelkoul H F J.Antiinflammatory and immunomodulating properties of fungalmetabolites.[J].Mediators of Inflammation,2014,2005(2):63.)、抗癌等药理作用(Paterson R R M.Cordyceps-A traditional Chinese medicine and another fungaltherapeutic biofactory？[J].Phytochemistry,2008,69(7):1469-1495.)。而提取物中多糖是其中最丰富、最重要的活性成分，具有降血糖活性(Zhang G,Huang Y,Bian Y,etal.Hypoglycemic activity of the fungi Cordyceps militaris,Cordyceps sinensis,Tricholoma mongolicum,and Omphalia lapidescensin streptozotocin-induceddiabetic rats[J].Applied Microbiology and Biotechnology,2006,72(6):1152-1156.)。食药用菌的固体菌种培养时间长，从子实体中提取多糖周期较长。而液体发酵可连续生产、产量大、生产周期短，且在发酵液中产生多糖、多肽、生物碱、萜类化合物、维生素、植物激素等多种具有生理活性的物质，得到类似于子实体的营养成分。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖的制备方法。该方法稳定可靠、实用性强。

本发明的另一目的在于提供所述方法制备得到的具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖。

本发明的再一目的在于提供所述具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种具有抑制巨噬细胞分泌NO功能的蛹虫草多糖的制备方法，包含如下步骤：