[发明专利]一种用于构建幼畜心肌炎细胞模型的细胞系及构建方法在审
| 申请号： | 202010061679.0 | 申请日： | 2020-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN111187751A | 公开（公告）日： | 2020-05-22 |
| 发明（设计）人： | 王光祥;王艳华;张志东;李彦敏;杨能能 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 构建 幼畜 心肌炎 细胞 模型 细胞系 方法 | ||
1.一种豚鼠心肌细胞系，其特征在于，所述细胞系为豚鼠心肌细胞系，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C201932。
2.如权利要求1所述的豚鼠心肌细胞系在构建幼畜心肌炎细胞模型中的应用。
3.如权利要求2所述的豚鼠心肌细胞系在构建幼畜心肌炎细胞模型中的应用，其特征在于，包括如下步骤：
(1)向权利要求1所述细胞系中接种口蹄疫病毒，25cm2/瓶接种口蹄疫病毒液1毫升，吸附10～30分钟后加心肌细胞培养基CMM 10mL，调pH至7.0～7.2，之后加入加青霉素、链霉素各100IU/ml，于37℃、5％CO2浓度培养箱中进行培养；
(2)经步骤(1)培养至细胞病变达到75％以上时，置-20℃反复冻融两次，待无菌检验、支原体检验、外源病毒检验合格后，幼畜心肌炎细胞模型构建完成。
4.如权利要求2所述的豚鼠心肌细胞系在构建幼畜心肌炎细胞模型中的应用，其特征在于，步骤(1)所述口蹄疫病毒为O型口蹄疫病毒、A型口蹄疫病毒或AsiaI型口蹄疫病毒。
5.如权利要求2所述的豚鼠心肌细胞系在构建幼畜心肌炎细胞模型中的应用，其特征在于，步骤(2)所述所述幼畜心肌炎模型的病毒TCID50≥6.00。
6.如权利要求2所述的豚鼠心肌细胞系在构建幼畜心肌炎细胞模型中的应用，其特征在于，所述幼畜心肌炎细胞模型中的肌钙蛋白I、肌红蛋白浓度为与未接种细胞系中浓度相比均达到2倍以上。
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