[发明专利]肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法

说明书

本发明公开了肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法，其包括，荧光免疫层析试纸条、微球溶液、样品稀释液；所述荧光免疫层析试纸条，包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板，所述层析膜上设置检测线和质控线，所述检测线上涂有抗人IgM抗体；所述微球溶液中，含有偶联着MP抗原的微球。本发明通过采用免疫层析试纸条提高了检测速率。通过采用荧光物质实现定量检测。通过在现有试纸条基础上改变了试纸条的构造，去除结合垫；并采用了不同的检测步骤，从而显著提高了特异荧光信号的强度和灵敏度，降低了检测背景干扰和非特异结合。

技术领域

本发明属于免疫分析技术领域，具体涉及肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法。

背景技术

肺炎支原体(MP)是一种无细胞壁的原核细胞，能与宿主呼吸道粘膜上皮细胞的甘露糖胺丙酮酸受体结合并产生毒素，导致肺炎。经血清流行病学研究显示：在中国20.7-38.9％的社区获得性肺炎患者由MP引起，居成人社区获得性肺炎病原体的首位。MP除导致呼吸道症状外，20-25％的病例可出现脑膜炎、心肌炎、溶血性贫血、血小板减少性紫癜等肺外表现。及时有效的诊断可有效控制MP感染病情的加重，降低死亡率。因此，MP的准确诊断具有重要的临床意义。

肺炎支原体的诊断方法主要依靠血清学检测，已报道的酶联免疫分析法(ELISA)和化学发光法(CLA)均可以检测特异性的IgG、IgM等抗体，而这些亚型与感染的病程相关。MP-IgM阳性可作为早期或急性感染的诊断指标，一般在感染约7天后可被检测到，10-30天后达到峰值，76.5％的患者2周后降低至无法检测到的程度。单次测定MP-IgM阳性即可判定为MP新近感染。因此临床强调对更加准确可靠的诊断技术的研制需求。

现用的ELISA和CLA操作简便，可定量检测MP-IgM，但耗时长，整个反应时间需要1个小时以上，且ELISA无法满足随到随检需求，因此若能保证试剂符合灵敏、定量技术要求的同时，提供一种快速、单人份检测试剂，则有利于临床医生快速诊断，缩短患者等候时间。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

作为本发明其中一个方面，本发明提供一种肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其包括：

荧光免疫层析试纸条、微球溶液、样品稀释液；

所述荧光免疫层析试纸条，包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板，所述层析膜上设置检测线和质控线，所述检测线上涂有抗人IgM抗体；

所述微球溶液中，含有偶联MP抗原的微球，微球的浓度为5～50μg/mL；所述MP抗原与微球偶联反应的质量比为1：10～100。

作为本发明所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的一种优选方案：所述样品稀释液中含有蛋白质和表面活性剂。

作为本发明所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的一种优选方案：所述样品稀释液包括含有0.1～1.0％BSA和0.1～2.0％S9的磷酸盐或Tris-HCl缓冲液。

作为本发明所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的一种优选方案：所述荧光微球，其为聚苯乙烯材质；所述微球，其直径为100～500nm。

作为本发明所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的一种优选方案：所述荧光微球，其荧光物质包括异硫氰酸荧光素或镧系元素；所述层析膜包括硝酸纤维素膜。