[发明专利]一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法

权利要求书

1.一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、样品预处理：给予ZCY-15灌胃后的SD大鼠血浆中，加入乙腈和内标工作液，混合涡旋，离心，之后提取上清液进样；

步骤二、样品分离：采用高纯球形硅胶微粒作为填充剂的Aqela Venusil ASB C8色谱柱(2.1×50mm，3μm)，柱温：40℃；超高液相系统采用通用型二元高压泵和进样器，选取乙腈-醋酸铵水溶液的混合液作为流动相，梯度洗脱；

步骤三、二级质谱仪检测样品：采用ESI离子源作为离子源，多反应监测模式(MRM)进行正离子模式检测；定量分析的离子分别为：ZCY-15：m/z313.2→163.1，碰撞能量为29eV，IS：m/z237→194.1，碰撞能量为25eV。

2.根据权利要求1所述的一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于：所述血浆样品采于周龄为7～9周、体重为210±30g的健康成熟SD大鼠；经眼眶后静脉丛取血250μL，高速离心后取上清液配制而成；取样量为80μL。

3.根据权利要求1所述的一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述乙腈为色谱级溶液。

4.根据权利要求1所述的一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述内标工作液为卡马西平甲醇溶液，浓度为1μg·mL^-1。

5.根据权利要求1所述的一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述醋酸铵水溶液浓度为5mmol·L^-1。

6.根据权利要求1所述的一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述流动相为乙腈(有机相)-醋酸铵水溶液的混合液，采用梯度洗脱的方法，流动相配比时间变化如下：

时间(min)	有机相(％)
0	55
0.6	55
2.1	95
3.1	95
3.2	55
3.6	55

表1

7.根据权利要求1所述的一种抗阿尔兹海默病候选化合物的血药浓度检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述质谱仪条件为毛细管电压4.0KV，锥孔电压25V，脱溶剂气温度和源温度分别为400℃和120℃。