[发明专利]含养殖环境噬菌体组合物的喷雾消毒剂、其制备方法和应用

说明书

本发明公开了含养殖环境噬菌体组合物的喷雾消毒剂、其制备方法和应用，该喷雾消毒剂包含体积比为0.1～100:1的总浓度大于10¹⁰PFU/mL的噬菌体或其组合物和浓度为100.0μg/mL的猪链球菌裂解酶LY7917，该噬菌体来源于养殖环境，且选自大肠杆菌噬菌体Ecp2、大肠杆菌噬菌体E20‑1或金黄色葡萄球菌噬菌体SLPW中的一种或两种以上组合。本发明的喷雾消毒剂采用喷雾杀菌方式可以有效发挥噬菌体和裂解酶协同灭菌作用，显著降低畜舍地面、空气及饲槽的细菌总数，消毒效率总体优于化学消毒剂戊二醛癸甲溴铵溶液，是一种绿色环保的畜禽养殖环境用消毒剂。

技术领域

本发明涉及生物消毒制剂，尤其涉及一种含养殖环境噬菌体组合物的喷雾消毒剂、其制备方法和应用。

背景技术

随着现代养殖的集约化和规模化，由养殖环境污染和细菌感染引起的疾病暴发日益严重，危害禽畜生产。目前，畜禽养殖通常采用化学消毒剂通过喷雾消毒来控制致病菌的传播，但化学消毒剂毒性较高，可能对动物机体造成伤害并污染环境，在一定程度上制约了其在畜禽上的应用。而且，随着耐药细菌的大量出现，对养殖场细菌污染的控制越来越困难，面对化学消毒剂和抗生素带来的种种问题，急需研制新型绿色环保的抗菌药物。裂解性噬菌体是细菌的天然“杀手”，而且由噬菌体编码的裂解酶(lysin)对特异性宿主的裂解同样非常高效，且不会产生耐药性与药物残留等问题，具有成为未来防控病原微生物新型抗菌药物的巨大潜力。

噬菌体及其裂解酶是细菌的天然“杀手”，噬菌体能迅速有效裂解其特异性宿主，并不产生残留和耐药性，是一种天然生物灭菌剂，将噬菌体及其裂解酶用于细菌防控已受到国内外科研工作者的高度认可与广泛关注。利用噬菌体防控畜禽产品食源性病原体的研究，如大肠杆菌O157:H7、空肠弯曲杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌等。国内科研人员也做过相似的噬菌体消毒试验，徐焰等进行了噬菌体XY杀灭环境水样内大肠埃希氏菌效果的试验，宋彬等对大肠杆菌的烈性噬菌体进行筛选，并观察其杀灭宿主菌的效果。然而上述试验均为在实验室进行的模拟消毒实验，均未运用裂解酶，噬菌体也是单独作用，且噬菌体分离于医院污水，而非养殖场环境，且未开展噬菌体及其裂解酶对养殖场实地环境致病菌的喷雾消毒试验。

发明内容

为了克服上述缺陷，本发明的主要目的在于提供一种含养殖环境噬菌体组合物的喷雾消毒剂，通过喷雾方式分别对噬菌体Ecp2、E20-1、SLPW和裂解酶LY7917的平板杀菌能力、模拟地面杀菌、对畜舍实地环境进行杀菌实验验证，得到一种绿色环保的抗菌药物。

本发明的另一目的在于提供上述喷雾消毒剂的制备方法。

本发明的再一目的还在于提供上述喷雾消毒剂在动物养殖环境杀菌消毒中的应用。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

本发明中，含养殖环境噬菌体组合物的喷雾消毒剂，包含总浓度大于10¹⁰PFU/mL的噬菌体或其组合物、和猪链球菌裂解酶LY7917，且所述噬菌体或其组合物和所述猪链球菌裂解酶LY7917的体积比为0.1～100:1；其中：

所述噬菌体来源于养殖环境，且选自大肠杆菌噬菌体Ecp2、大肠杆菌噬菌体E20-1或金黄色葡萄球菌噬菌体SLPW中的一种或两种以上组合。

所述猪链球菌裂解酶LY7917的浓度为100.0μg/mL。

所述噬菌体组合物中，不同噬菌体溶液按照等体积比混合。

所述喷雾消毒剂的喷雾粒径小于100μm，优选为30～40μm。

本发明的喷雾消毒剂通过总浓度大于10¹⁰PFU/mL的噬菌体溶液或其组合物和所述猪链球菌裂解酶LY7917溶液按体积比为0.1～100:1混合均匀得到；其中，所述噬菌体溶液的制备方法为：