[发明专利]用于治疗卵巢癌的双靶点嵌合抗原受体及制备方法与应用

权利要求书

1.一种用于治疗卵巢癌的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，自氨基端到羧基端依次包括具有与PD-L1配体结合的结构域、MUC16单链抗体、铰链区、跨膜域和胞内域；其中，

所述与PD-L1配体结合的结构域为PD-1etco，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；

所述MUC16单链抗体是针对卵巢癌细胞表面肿瘤抗原MUC16设计的特异性抗原结合域，其由MUC16单链抗体重链4H11-VH及MUC16单链抗体轻链4H11-VL构成，所述MUC16单链抗体重链4H11-VH氨基酸序列如SEQIDNo.2所示；所述MUC16单链抗体轻链4H11-VL氨基酸序列如SEQIDNo.3所示。

2.如权利要求1所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述胞内域包括共刺激信号传导结构域和CD3ζ信号传导结构域。

3.如权利要求2所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于所述嵌合受体的具体结构为：

自氨基端到羧基端依次由所述PD-1etco、连接肽、MUC16单链抗体重链4H11-VH、连接肽、所述MUC16单链抗体轻链4H11-VL、所述铰链区、所述跨膜域、所述共刺激信号传导结构域、所述CD3ζ信号传导结构域。

4.如权利要求3所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述的连接肽为(Gly4Ser)3连接肽，所述连接肽的氨基酸序列如SEQIDNo.8。

5.如权利要求3所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述铰链区为CTLA4的铰链区、CD28的铰链区、CD7的铰链区、IgG1的铰链区、IgG4的铰链区、IgD的铰链区、CD8α的铰链区和PD-1的铰链区中的一种或多种。

6.如权利要求5所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述铰链区为含有CD8α的铰链区CD8αhinge，其氨基酸序列如SEQIDNo.4所示。

7.如权利要求3所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述跨膜域为CD4的跨膜域、CD7的跨膜域、CD8α的跨膜域、CD28的跨膜域、CD134的跨膜域、CD137的跨膜域、FcεRIγ的跨膜域和H2-Kb的跨膜域中的一种或多种。

8.如权利要求7所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述跨膜域为CD8α的跨膜域CD8TM，其氨基酸序列如SEQIDNo.5所示。

9.如权利要求3所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述共刺激信号传导结构域为CD28、41BB、ICOS、OX40、CD244、FcεRIγ、CD8α、BTLA、CD27、CD30、GITR、HVEM、DAP10、CD2、NKG2C、LIGHT和DAP12中的一种或多种。

10.如权利要求9所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述共刺激信号传导结构域为41BB，其氨基酸序列如SEQIDNo.6所示。

11.如权利要求3所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述CD3ζ信号传导结构域为CD3zeta，其核苷酸序列如SEQIDNo.7所示。

12.如权利要求3所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于：

所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQIDNo.9所示。

13.编码权利要求12所述的嵌合抗原受体的基因，其特征在于：

所述基因如SEQIDNo.10所示。

14.如权利要求13所述的基因，其特征在于：

编码所述PD-L1配体结合的结构域PD-1etco的基因的核苷酸序列如SEQIDNo.11所示。