[发明专利]一种固体发酵凝结芽孢杆菌的方法

权利要求书

1.一种固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：包括如下步骤：

S100、菌种培养活化：在无菌操作下，用无菌微量吸管，从已溶解的管中吸取50μL的菌液，滴入固态指定培养基边缘附近，以划线法接种于培养基；

S200、菌种接种繁殖：将活化后的芽孢杆菌溶液转接到液体培养基上进行接种繁殖，传代繁殖2~3次，获取芽孢杆菌的种子液；

S300、基体消毒灭菌：将用于固态发酵的固体培养基放入到高温灭菌箱内进行消毒灭菌，获取纯净健康的固态培养基；

S400、菌种固体发酵：将芽孢杆菌的种子液接种到灭菌后的固态培养基上，并在35~45摄氏度的无菌环境下进行发酵培养。

2.根据权利要求1所述的固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：步骤S100中，固态指定培养基为为固体琼脂板。

3.根据权利要求1所述的固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：步骤S200中，菌种接种繁殖在振动环境下进行，且菌种接种繁殖的振动频率为10~30Hz。

4.根据权利要求1所述的固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：步骤S200中，菌种接种繁殖过程中监测液体培养基的pH，并调节pH保持在6.8~7.2。

5.根据权利要求1所述的固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：步骤S200中，液体培养基成分及百分比含量为：

胰蛋白胨： 0.5~0.8%；

酵母膏： 1.5~2.0%；

磷酸氢二钾： 0.3~0.5%；

葡萄糖： 0.2~0.5%；

蒸馏水： 余量。

6.根据权利要求1所述的固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：步骤S300中，固体培养基成分及百分比含量为：

胰蛋白胨： 0.5~0.8%；

肉浸液： 1.5~2.0%；

磷酸氢二钾： 0.3~0.5%；

葡萄糖： 0.2~0.5%；

氯化钠： 0.1~0.2%；

琼脂： 1.5~3.0%；

蒸馏水： 余量。

7.根据权利要求1所述的固体发酵凝结芽孢杆菌的方法，其特征在于：步骤S400中，菌种固体发酵在无菌环境下进行，并且与外部环境进行隔离培养。