[发明专利]一种提高异源蛋白分泌量的信号肽突变体及其构建方法与用途

权利要求书

1.一种提高异源蛋白分泌量的信号肽突变体，其特征在于：所述信号肽突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。

2.编码权利要求1所述信号肽突变体的基因。

3.权利要求1所述信号肽突变体在提高异源蛋白分泌表达中的用途。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述异源蛋白为碱性蛋白酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

5.一种重组载体，其特征在于：含有权利要求1所述信号肽突变体的编码基因。

6.一种宿主细胞，其特征在于：含有权利要求1所述信号肽突变体的编码基因或权利要求5所述重组载体。

7.一种异源蛋白的生产方法，其特征在于：步骤如下：

将含有权利要求1所述信号肽突变体的编码基因以及异源蛋白的编码基因的基因工程菌经活化后以1.5-5％的接种量转接于发酵培养基中，于34-40℃、215-225r/min发酵培养20-50h；所述发酵培养基组成为：玉米粉60-70g/L，豆饼粉30-50g/L，磷酸氢二钠2-8g/L，磷酸二氢钾0.1-0.6g/L，高温淀粉酶0.5-1.0g/L，余量为水；

或者发酵培养基组成为：木聚糖8-12g/L，蛋白胨2-8g/L，酵母粉1-1.5g/L，K₂HPO₄1-3g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1-0.4g/L，氯化钠2-8g/L，琼脂粉10-20g/L，余量为水；

或者发酵培养基组成为：葡萄糖6-12g/L，蛋白胨8-16g/L，酵母膏20-30g/L，磷酸氢二钠8-14g/L，磷酸二氢钾1-5g/L，余量为水，p H 7.0-7.5。

8.如权利要求7所述的生产方法，其特征在于：所述异源蛋白为碱性蛋白酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述发酵培养基组成为：玉米粉64g/L，豆饼粉40g/L，磷酸氢二钠4g/L，磷酸二氢钾0.3g/L，高温淀粉酶0.7g/L，余量为水，pH自然。