[发明专利]一种基于铁醇盐纳米酶的As5+

权利要求书

1.一种基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于，检测步骤如下：

(1)用去离子水配制1mg·mL^-1的铁醇盐纳米酶溶液，分别取100μL的铁醇盐纳米酶溶液分散在2700μL醋酸-醋酸盐缓冲溶液中，加入100μL不同浓度的As⁵⁺，孵化0.5～5min；所述铁醇盐纳米酶，其制备步骤包括：

A、按固液比为7.5mM:9g:150～450mL，将FeCl₃·6H₂O或Fe(NO₃)₃·9H₂O和尿素分散在乙二醇里，充分溶解成混合溶液；

B、混合溶液在150～250℃溶剂热反应20～40min；

C、铁醇盐纳米酶离心收集，并用乙醇和去离子水洗净，50～70℃干燥18～30h；

(2)分别将100μL的5mM的TMB乙醇溶液加入上述混合溶液中，孵化10～30min；

(3)用紫外-可见吸收分光光度计测定混合溶液紫外吸收光谱，记录波长为652nm处的吸光度并绘制As⁵⁺浓度-吸光度标准工作曲线；

(4)取100μL的1mg·mL^-1铁醇盐纳米酶溶液分散在2700μL醋酸-醋酸盐缓冲溶液中，加入100μL待测As⁵⁺样品，孵化0.5～5min，再加入100μL的5mM的TMB乙醇溶液，孵化10～30min，以紫外-可见吸收分光光度计测定652nm处的吸光度；

(5)通过计算与As⁵⁺浓度-吸光度标准工作曲线比对，即可获得待测样品的As⁵⁺浓度。

2.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(1)所述醋酸-醋酸盐缓冲溶液浓度0.2M，pH为4.0。

3.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(1)所述As⁵⁺溶液浓度为3.33～333.33μg·L^-1。

4.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(1)所述用去离子水配制1mg·mL^-1的铁醇盐纳米酶溶液，分别取100μL的铁醇盐纳米酶溶液分散在2700μL醋酸-醋酸盐缓冲溶液中，加入100μL不同浓度的As⁵⁺，孵化2min。

5.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(1)A中所述固液比为7.5mM:9g:300mL。

6.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(1)B中所述混合溶液在195℃反应30min。

7.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(1)C中60℃干燥24h后即得。

8.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(2)所述分别将100μL的5mM的TMB乙醇溶液加入上述混合溶液中，孵化20min。

9.根据权利要求1所述基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，其特征在于：步骤(4)所述待测As⁵⁺样品检测范围为3.33～333.33μg·L^-1，检测低限为1.57μg·L^-1。