[发明专利]一种基于铁醇盐纳米酶的As5+

说明书

本发明属于分析化学技术领域，涉及As⁵⁺的检测方法，尤其涉及一种基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，包括：用去离子水配制1 mg·mL^‑1的铁醇盐纳米酶溶液，分别取100µL的铁醇盐纳米酶溶液分散在2700µL醋酸‑醋酸盐缓冲溶液中，加入100µL不同浓度的As⁵⁺，孵化0.5～5 min；分别将100µL的5 mM的TMB乙醇溶液加入，孵化10～30 min；用紫外‑可见吸收分光光度计测定混合溶液紫外吸收光谱，记录波长为652 nm处的吸光度并绘制标准工作曲线；将待测As⁵⁺样品重复上述步骤测定吸光度；并与标准工作曲线比对，即得As⁵⁺浓度。本发明利用铁醇盐纳米酶比色检测As⁵⁺，检测过程条件温和，实现As⁵⁺的方便、快速检测，成本低廉；检测范围宽至3.33～333.33µg·L^‑1，满足世界卫生组织对砷离子的最低限制。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，涉及As⁵⁺的检测方法，尤其涉及一种基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法。

背景技术

由于矿产的开发和工业废水的排放，无机砷污染在全球范围内日趋严重。据调查，全球至少有2000万人生活在严重无机砷污染的地区。在自然界中，五价砷酸盐(As⁵⁺)和三价亚砷酸盐(As³⁺)是无机砷的最常见的化学形态。无机砷具有很强的毒性和致癌性，严重威胁人体健康，此世界卫生组织(WHO)严格规定饮用水中的砷含量不得高于10μg·L^-1。因此，无机砷的定量检测，对环境保护和公共健康具有重要意义。

目前针对无机砷检测方法主要有仪器分析法、电化学法、生物传感法和比色法等，其中仪器分析法包括原子吸收光谱、原子发射光谱法和原子荧光光谱法等，具备有检测限低、选择性优、精确度好等特点。但适用的线性范围较窄，且操作步骤繁琐等缺点极大地限制了其应用。电化学方法可用于砷的多种形态的分析，由于电化学法在测定无机砷过程中产生的是电信号，因而电化学法适用于无机砷连续不间断检测。但是电化学法检测无机砷容易受电极影响，且电极寿命较短，成本高昂。生物传感分析法检测无机砷具有较高的灵敏度度、可移植性、样本需求量低等优点，可以用于痕量无机砷的定量和定性检测分析。但这种方法需要专门的基因工程和生物技术细胞转化，步骤繁琐，且成本昂贵，应用范围有限。比色法能进行可视化检测，是一种较为直观的无机砷检测方法。

此外，纳米酶作为一种新兴的纳米材料，具有与天然酶类似的催化活性，能够催化一些特定的反应。纳米酶比色法，采用纳米酶来检测目标物具有合成方便、原理简单和成本低廉等优点，因此纳米酶比色法是一种较为理想的无机砷检测方法。

发明内容

针对上述现有技术中存在的不足和限制，本发明的目的在于公开一种基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法。

技术方案

一种基于铁醇盐纳米酶的As⁵⁺比色检测法，步骤如下：

(1)用去离子水配制1mg·mL^-1的铁醇盐纳米酶溶液，分别取100μL的铁醇盐纳米酶溶液分散在2700μL醋酸-醋酸盐缓冲溶液中，加入100μL不同浓度的As⁵⁺，孵化0.5～5 min，优选2min；

(2)分别将100μL的5mM的TMB乙醇溶液加入上述混合溶液中，孵化10～30min，优选20min；

(3)用紫外-可见吸收分光光度计测定混合溶液紫外吸收光谱，记录波长为652nm处的吸光度并绘制As⁵⁺浓度-吸光度标准工作曲线；

(4)将待测As⁵⁺样品重复步骤(1)～(3)，以紫外-可见吸收分光光度计测定652nm处吸光度；