[发明专利]一种用于检测非洲猪瘟病毒DNA的组合物及试剂盒在审
| 申请号： | 202010081958.3 | 申请日： | 2020-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN111254220A | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 廖东升;赵伟;鞠青;邱坤 | 申请（专利权）人： | 成都导胜生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都中络智合知识产权代理有限公司 51300 | 代理人： | 喻依丰 |
| 地址： | 610000 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 非洲 猪瘟 病毒 dna 组合 试剂盒 | ||
1.一种用于检测非洲猪瘟病毒DNA的组合物，其特征在于：包含A组或者包含A组在内的多组引物对和探针；
所述A组由引物对引物-F：SEQ ID NO：1，引物-R：SEQ ID NO：2和探针：SEQ ID NO：9组成；
另一组B由引物对引物-F：SEQ ID NO：3，引物-R：SEQ ID NO：4和探针：SEQ ID NO：10组成；还包括
另一组C由引物对引物-F：SEQ ID NO：5，引物-R：SEQ ID NO：6和探针C：SEQ ID NO：11组成；还包括
另一组D由引物对引物-F：SEQ ID NO：7，引物-R：SEQ ID NO：8和探针D：SEQ ID NO：12组成。
2.根据权利1所述的一种用于检测非洲猪瘟病毒DNA的组合物，其特征在于：所述探针A、探针B和探针C均包含荧光分子5’端的荧光基团和3’端的淬灭基团，所述5’端采用FAM、HEX、CY3、CY5、VIC、ROX中任一一种，所述3’端对应的采用BHQ1、BHQ2、Dabcyl、TAMRA、eclipse中任一一种。
3.根据权利1所述的一种用于检测非洲猪瘟病毒DNA的组合物，其特征在于：还包括内标，内标引物-F：SEQ ID NO：13；内标引物-R：SEQ ID NO：14；内标探针：SEQ ID NO：15，其中内标探针含荧光分子5’端的荧光基团为VIC，3’端的淬灭基团为Bhq1。
4.一种试剂盒，其特征在于：包含权利要求1-3中任一项所述的一种用于检测非洲猪瘟病毒DNA的组合物。
5.根据权利4所述的一种试剂盒，其特征在于：还包括扩增反应体系，具体由5ul的10XPCRmix溶液、4ul浓度为10mmol/l的dNTP mix溶液、1ul浓度为5U/mL的UNG酶、1ul2.5U/mL的TaqDNA聚合酶、浓度均为10umol/l的引物F和引物R各1ul，以及1ul的探针，1-5ul的模板和31-35ul的水组成50ul的扩增反应体系。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述10X PCRmix溶液具体由500mmol/l的KCl、100mmol/l且PH＝9.0的TRIS-HCl和1％Triton-X组成。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述dNTP mix溶液具体由7.5mmol/l的dUTP、2.5mM/L的dTTP、10mM/L的dATP、dGTP和dCTP组成。
8.根据权利要求4-7任一项所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒在用于非洲猪瘟病毒检测中的应用。
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