[发明专利]一种sBCMA磁微粒化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种sBCMA磁微粒化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用，包括：偶联链霉亲和素的磁微粒、生物素标记的sBCMA抗体、化学发光标记物标记的sBCMA抗体、sBCMA蛋白校准品、清洗液和激发液。本发明提供的试剂盒在检测sBCMA蛋白时，利用磁微粒作为载体，待测样品、生物素标记的sBCMA抗体和化学发光标记物标记的sBCMA抗体形成“三明治夹心”结构，反应快速，干扰因素较少。同时，通过链霉亲和素和生物素的放大效应，使得所述试剂盒具有较宽的线性范围，且稳定性更好，检测更加便捷，检测结果准确可靠。

技术领域

本发明属于化学发光免疫分析技术领域，涉及一种sBCMA磁微粒化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种以血液和尿液含有高浓度单克隆抗体为主要特征的克隆性浆细胞异常增殖的恶性肿瘤，占全部恶性肿瘤的1％，其发病率位居血液系统恶性肿瘤第2位，多发于老年人。目前，临床上缺乏有效的标志物对多发性骨髓瘤进行诊断和预后监测，对于疑似MM的患者，需要进行凝血功能、血清蛋白电泳(包括M蛋白含量)、尿免疫固定电泳、骨髓活检、血液血清游离轻链(sFLC)测定等大量检验以达到诊断目的，预后监测同样需要进行大量的检测。

B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen，BCMA)，又称为肿瘤坏死因子受体超家族成员17(TNFRS17)，是一种III型跨膜蛋白，仅表达在成熟B细胞表面。BCMA的表达与许多癌症，自身免疫性疾病和感染性疾病相关。具有增加的BCMA表达的癌症包括一些血液癌症，例如多发性骨髓瘤，霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤，各种白血病和胶质母细胞瘤等。BCMA是用于治疗MM的合适的靶抗原。

BCMA胞外部分可被γ-分泌酶切割形成可溶性BCMA(sBCMA)。研究表明，测定血液sBCMA水平可为MM患者提供重要的诊断和预后监测信息。诊断方面，活跃期MM患者的血清sBCMA浓度高于早期MM患者，且均明显高于健康人。预后监测方面，MM病人接受治疗后，外周血中的sBCMA比M蛋白降低速度更快，且其浓度不受肾功能的影响，较sFLC检测更可靠，能更好的预测治疗响应状态。

磁微粒化学发光免疫检测技术是利用具有超顺磁性、粒径均一的固体粒子作为固相载体包被抗体或抗原，同时将具有高灵敏度的化学发光技术与之相结合，用于测定各种蛋白、激素、小分子药物等的免疫检测技术，是在放射免疫检测技术(IRMA)和酶联免疫吸附检测技术(ELISA)的基础上发展而来的免疫分析技术，具有灵敏度高等优点。

目前，国内外检测sBCMA的方法主要是酶联免疫吸附测定法，该方法线性范围窄，稳定性较差，操作繁琐，检测时间长，自动化程度低，易受人为操作影响，制约了sBCMA检测的应用。

因此，本领域急需开发一种能够快速高效诊断多发性骨髓瘤，且检测结果准确可靠的sBCMA检测试剂盒，以满足市场需求。

发明内容

鉴于现有技术中存在的问题，本发明提供一种sBCMA磁微粒化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用，所述免疫检测试剂盒制备方法简单，检测待测样品时实验操作也较为简便，检测效率高，所得检测结果准确可靠。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种sBCMA磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，包括：偶联链霉亲和素的磁微粒、生物素标记的sBCMA抗体、化学发光标记物标记的sBCMA抗体、sBCMA蛋白校准品、清洗液和激发液。

本发明提供的sBCMA检测试剂盒，在检测待测样品中的sBCMA蛋白时，sBCMA蛋白、生物素标记的sBCMA抗体和化学发光标记物标记的sBCMA抗体能够形成“三明治夹心”结构，同时链霉亲和素和生物素结合，利用磁微粒作为载体，使得本发明提供的检测试剂盒具有反应快速、干扰因素较少和检测结果准确可靠等优点，同时，链霉亲和素和生物素的放大效应使得所述试剂盒具有较宽的线性范围。