[发明专利]一种小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法

权利要求书

1.一种小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，依次包括下述步骤：

1)SPF级3～4周龄HLA-B27转基因小鼠雌雄各半，12h明暗交替，SPF级环境下适应性饲养5天；

2)将自发AS食蟹猴粪便代谢物经过滤除菌后，灌肠步骤1)中的SPF级HLA-B27小鼠，在SPF级环境下饲养，灌肠后的第11周检查，评价。

2.根据权利要求1所述的小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，饲养环境：温度20～26℃，相对湿度40～70％。

3.根据权利要求1所述的小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，所述的粪便代谢物通过下述方法制得的：取确诊的自发强直性脊柱炎食蟹猴新鲜粪便20g，置于无菌的50mL离心管，加入无菌注射生理盐水40mL，震荡混匀，30min，使用200目筛粗过滤，之后使用0.22μm滤膜过滤，得到澄清液体。

4.根据权利要求1所述的小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，所述的小鼠灌肠前，禁食不禁水过夜，以清空肠道；取粪便代谢产物用9号灌胃针每只灌肠0.5mL，提起尾巴倒置10min，之后放下，正常活动、饲养，每周1次，持续10周。

5.根据权利要求1所述的小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，所述的模型评价方法

(1)动物大体观察：每日观察动物的一般状态，是否驼背、关节是否肿大、关节活动度是否异常；

(2)影像学检查：35mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠，使用X光或CT检查动物椎体、四肢关节是否出现软骨损伤、韧带钙化、骨赘、骨性强直；

(3)血液学指标评价：35mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠后，腹主动脉采血，EDTA2K抗凝采血管采血100μL进行血常规相关指标检测和分析；不抗凝采血200μL，1000g离心10min，分离血清，进行C反应蛋白含量，及血生化相关指标检测和分析。

6.根据权利要求5所述的小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，所述血常规检验指标为白细胞含量、血小板含量、血红蛋白含量。

7.根据权利要求5所述的小鼠强直性脊柱炎模型的构建方法，其特征在于，所述血生化相关指标为白蛋白含量、球蛋白含量和碱性磷酸酶含量。