[发明专利]同时检测包括2019-nCoV在内的四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒

权利要求书

1.用于检测2019-nCoV人冠状病毒荧光定量RT-PCR/qRT-PCR的特异性引物，其特征是：包括特异性引物1，具体如SEQ ID No.1：GGGGAACTTC TCCTGCTAGA AT；特异性引物2，SEQ IDNo.2：CAGACATTTT GCTCTCAAGC TG。

2.用于检测2019-nCoV人冠状病毒荧光定量RT-PCR/qRT-PCR的探针，其特征是：2019-nCoV探针，具体如SEQ ID No.9：5'VIC-TTGCTGCTGC TTGACAGATT-3'MGB。

3.如权利要求2所述用于检测2019-nCoV人冠状病毒荧光定量RT-PCR/qRT-PCR的探针，其特征是：所述2019-nCoV探针5'端标记VIC荧光基团，3'端标记MGB荧光淬灭基团。

4.同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，其特征是：应用于RT-PCR/qRT-PCR检测；所述检测试剂盒具体包括：四对特异性引物对和四条探针，阳性质控品。

所述四种人冠状病毒分别对应的一对特异性引物和一条探针；所述阳性质控品具体为一条人工合成的靶序列。

5.如权利要求4所述同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/ HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，其特征是：

针对人冠状病毒2019-nCoV，特异性引物对包括特异性引物1和特异性引物2，特异性引物1的序列如SEQ ID No.1，特异性引物2的序列如SEQ ID No.2；2019-nCoV探针序列如SEQID No.9；

针对人冠状病毒MERS-CoV，特异性引物对包括特异性引物3和特异性引物4，特异性引物3的序列如SEQ ID No.3，特异性引物4的序列如SEQ ID No.4；MERS-CoV探针序列如SEQID No.10；

针对人冠状病毒HCoV-OC43，特异性引物对包括特异性引物5和特异性引物6，特异性引物5的序列如SEQ ID No.5，特异性引物6的序列如SEQ ID No.6；HCoV-OC43探针序列如SEQID No.11；

针对人冠状病毒HCoV-HKU1，特异性引物对包括特异性引物7和特异性引物8，特异性引物7的序列如SEQ ID No.7，特异性引物8的序列如SEQ ID No.8；HCoV-HKU1探针序列如SEQID No.12。

6.如权利要求5所述同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/ HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，其特征是：所述2019-nCoV探针5'端标记VIC荧光基团，3'端标记MGB荧光淬灭基团； MERS-CoV探针5'端标记FAM荧光基团，3'端标记MGB荧光淬灭基团； HCoV-OC43探针5'端标记ROX荧光基团，3'端标记MGB荧光淬灭基团；HCoV-HKU1探针5'端标记Cy5荧光基团，3'端标记MGB荧光淬灭基团。

7.如权利要求4所述同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/ HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，其特征是：所述阳性质控品靶序列涵盖了四对特异性引物对和四条探针的片段。

8.如权利要求7所述同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/ HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，其特征是所述阳性质控品靶序列具体如SEQ IDNo.13。

9.如权利要求4所述同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/ HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，其特征是：以无菌水或超纯水作为阴性质控品。

10.如权利要求4-9之一所述同时检测2019-nCoV/MERS-CoV/HCoV-OC43/ HCoV-HKUI四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒在2019-nCoV、MERS-CoV、HCoV-OC43、HCoV-HKUI四种人冠状病毒qRT-PCR检测中的应用。