[发明专利]同时检测包括2019-nCoV在内的四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种同时检测包括2019‑nCoV在内的四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒具体，属于检测技术领域。其应用于RT‑PCR/qRT‑PCR检测；所述检测试剂盒具体包括：四对特异性引物对和四条探针，阳性质控品。所述四种人冠状病毒分别对应的一对特异性引物和一条探针序列；所述阳性质控品具体为一条人工合成的靶序列。以无菌水或超纯水作为阴性质控品。本发明可快速同时甄别2019‑nCoV/MERS‑CoV/HCoV‑OC43/HCoV‑HKUI四种人冠状病毒，具有检测灵敏度高、特异性强、可实现多重快速检测、操作简单、应用方便等突出的优点。

技术领域

本发明涉及一种同时检测包括2019-nCoV在内的四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒具体涉及用于检测2019-nCoV、MERS-CoV、HCoV-OC43、HCoV-HKUI四种人冠状病毒的试剂盒，属于检测技术领域。

背景技术

人冠状病毒(Human Coronaviruses，hCoVs)感染是引起人类呼吸道疾病的重要病原之一，在常见呼吸道病原体中冠状病毒检出率约为3％-10％，是感染婴幼儿、老人及免疫功能低下的成人，从而引发咳嗽、发热、喉炎、支气管炎以及肺炎等临床症状的重要病原。目前，已知的人冠状病毒共有七种，分别是19世纪六十年代发现的人冠状病毒229E(Humancoronavirus 229E,HCoV-229E)和HCoV-OC43，2003年出现的严重急性呼吸综合征(Severeacute respiratory syndrome,SARS)冠状病毒SARS-CoV，2004年在荷兰分离鉴定的新型人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)，2005年在香港分离鉴定的新型人冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1)，2012年6月在中东地区出现的中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)冠状病毒MERS-CoV，以及2019年出现并爆发流行的新型冠状病毒2019-nCoV。

流行病学研究表明，HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43和HCoV-HKUI这四种人冠状病毒在世界各地均有流行，呈全球性分布，临床症状主要表现为发热、咳嗽、鼻炎、喉炎以及支气管炎、肺炎等，给人类生命健康造成一定的负担。SARS-CoV和MERS-CoV以及2019-nCoV这三种冠状病毒感染人后却能造成急性呼吸道症状，严重者引发呼吸系统和肾功能系统衰竭并造成死亡。SARS-CoV自2003年出现后共造成全球约9000人感染，约800死亡，死亡率近10％。得益于全球有效的疾病防控措施，目前SARS-CoV已经消失未见流行报道。MERS-CoV作为新近出现第六种人冠状病毒，目前全球已有26个国家及地区报道了确诊病例2428例，死亡839例，死亡率高达34.6％。MERS-CoV目前主要在中东沙特阿拉伯地区流行，韩国在2015年出现过一次集中爆发流行，我国也有一例从韩国输入性病例。MERS-CoV不仅是国内疾控重点监测的传染病，同时也是目前国境口岸严防传入的重要传染病之一。