[发明专利]苦瓜外泌体的提取方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用有效
| 申请号： | 202010090930.6 | 申请日： | 2020-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN111218420B | 公开（公告）日： | 2021-09-14 |
| 发明（设计）人： | 齐素华;马萍;王斌;顾兵;王婉 | 申请（专利权）人： | 徐州医科大学 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;A61K36/42;A61P35/00;A61K131/00 |
| 代理公司： | 徐州千秋知识产权代理事务所(普通合伙) 32556 | 代理人： | 周敏 |
| 地址： | 221004 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 苦瓜 外泌体 提取 方法 及其 制备 肿瘤 药物 中的 应用 | ||
1.苦瓜外泌体在制备抗肿瘤药物中的应用，所述抗肿瘤药物为抑制胶质瘤细胞或肝癌细胞增殖和迁移浸润的药物，所述苦瓜外泌体的提取方法包括以下步骤：
(1)取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；
(2)晾干后榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，于4℃，1000g，10min；3000g，20min；10000g，40min；离心后取上清，弃沉淀；
(3)将取得的上清超速离心，于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1-2mL的磷酸缓冲盐溶液中；
(4)将悬浮液用0.22μm的滤膜过滤，滤液再次于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1-2mL的磷酸缓冲盐溶液中。
2.苦瓜外泌体在制备肿瘤细胞增殖抑制剂中的应用，所述肿瘤细胞为胶质瘤细胞或肝癌细胞，所述苦瓜外泌体的提取方法包括以下步骤：
(1)取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；
(2)晾干后榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，于4℃，1000g，10min；3000g，20min；10000g，40min；离心后取上清，弃沉淀；
(3)将取得的上清超速离心，于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1-2mL的磷酸缓冲盐溶液中；
(4)将悬浮液用0.22μm的滤膜过滤，滤液再次于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1-2mL的磷酸缓冲盐溶液中。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述胶质瘤细胞为T98G胶质瘤细胞，所述肝癌细胞为HepG2肝癌细胞。
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