[发明专利]一组miRNA在制备作为用于早期乳腺癌筛查的标志物中的应用

说明书

本发明公开一组miRNA在制备作为用于早期乳腺癌筛查的标志物中的应用，首次发现在人母乳中存在着完整性和相对丰度与乳腺细胞非常一致游离miRNA。通过比较已有研究确认的乳腺癌异常表达异常miRNA，分析出一组可潜在应用于早期乳腺癌筛查的母乳游离miRNA，其中在早期乳腺癌发生发展过程中预期会上调的有26种，预期下调的12种。并提出了理论可行的应用检测方案。以母乳作样本，本发明通过检测母乳中乳腺癌相关游离miRNA标志物丰度变化，来检测早期乳腺癌罹患风险。

技术领域

本发明涉及miRNA，具体涉及一组可潜在应用于早期乳腺癌筛查的母乳游离miRNA及其应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的癌症。国家癌症中心发布的2018年全国最新乳腺癌报告显示，中国女性乳腺癌发病例数和死亡例数分别占全球发病和死亡的11.2％和9.2％,在世界范围位居前列。女性乳腺癌发病和死亡分别位居我国女性恶性肿瘤发病和死亡的第1位和第5位。

乳腺癌5年生存率相对比较高，大概在80％左右；早期乳腺癌的治愈率可高达90％。因此对于乳腺癌，早发现、早治疗是关键。目前常用的40岁以下的乳腺B超和40岁以上乳腺钼靶X线检查，都是有可疑肿块、囊肿等异常才能发现。而仪器可辨识瘤块发生之前，极早期的乳腺癌潜伏发展过程目前仍没有办法进行检测。

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约16～29个核苷酸，在细胞内对基因的表达起到重要的调节作用。成熟的miRNAs通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻止靶mRNA的翻译。miRNAs的表达变化及其对靶基因的综合调控的作用与乳腺癌发生发展、特殊肿瘤表型的形成及肿瘤的预后有着深远影响。近年来，通过检测特定组织来源的血浆循环miRNA(Circulating MicroRNA)进行早期癌症患病风险筛查被广泛关注。游离miRNA作为血清中的生物标志物，比常用的蛋白肿瘤标志物有着更高的灵敏度与特异性。通过特异游离miRNA早筛，有可能让肿瘤的发生被更早、更有效地辨别出来。但实际真正作为肿瘤标志物并不多，原因在于作为肿瘤标志物，必须具有特异性和可靠性，但很多miRNA虽然在肿瘤高表达，实际上其在癌旁或正常组织也有表达，其特异性低和可靠性差，尤其是肿瘤早期筛查期间，易造成误诊或延误病情，故实际临床上miRNA作为肿瘤标志物的产品很少。

血浆循环miRNA中来源于乳腺组织细胞的份额是很少的，来自癌变早期的变异细胞的miRNA就更少。因此在早期乳腺癌发生过程中，通过监测血浆循环miRNA的水平来筛查变异细胞中发生的miRNA丰度变化的难度很大，且检测灵敏度和可靠性也是极大的挑战。与血浆相比，更为理想的极早期乳腺癌筛查无创样本应该是母乳，因为母乳直接来源于乳腺。若乳汁中也含有类似于血浆里的游离miRNA，那么这些miRNA应该多数是直接来源于乳腺相关的脱落细胞，相比血浆miRNA只有极少部分可能是来自于乳腺，母乳miRNA的优势一目了然。

本发明针对于现有技术存在的对于常规血浆难以检测早期乳腺癌的miRNA的技术难题，提出检测母乳中miRNA，母乳游离miRNA可以作为乳腺癌无创早期筛查的肿瘤标志物。

发明内容

本发明所解决的技术问题：为克服现有技术的不足，本发明提供一种检测方法，其检测早期乳腺癌发生发展过程中上调的有26种miRNA，下调的12种miRNA，可以作为乳腺癌早期筛查的标志物。

解决技术问题采用的技术方案：

一组miRNA在制备作为用于早期乳腺癌筛查的标志物中的应用，miRNA包括如下：

其中在早期乳腺癌发生发展过程中预期会上调的有26种：