[发明专利]一种基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法

权利要求书

1.一种基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，其特征在于：由以下步骤组成：

步骤一，在待提取核酸的生物样本中加入蛋白酶K，快速混匀，得混合溶液；

步骤二，在步骤一所得混合溶液中加入结合缓冲液和Carrier RNA；

步骤三，将步骤二所得混合液滴加在玻纤滤纸上，玻纤滤纸以双圈滤纸为支撑物固定，过滤的废液用吸水纸吸去；

步骤四，用洗涤缓冲液清洗，再用吸水纸吸去废液；

步骤五，在玻纤滤纸上滴加洗脱缓冲液，收集过滤的洗脱液即获得所需核酸溶液；所述步骤三中，玻纤滤纸为圆形，直径为6-10mm，所述玻纤滤纸为100%硼硅酸玻璃纤维，用PET单面透明胶带固定在双圈滤纸的亲水区域中；

所述步骤二中，结合缓冲液包括1-8M盐酸胍、10-200mM Tris-HCl、10-100mM EDTA、100-800mM NaCl、0.5%-2% SDS；

所述步骤三中，双圈滤纸包含喷蜡疏水区和亲水区，亲水区域为圆形，直径为8-12 mm；

所述步骤四中，洗涤缓冲液包括1-10mM EDTA、10-100mM Tris-HCl、10-100mM NaCl和55％-75％乙醇；

所述步骤四中，洗脱缓冲液包括10-100mM Tris-HCl、1-10mM EDTA；所述Tris-HCl的pH值为7.0-8.5。

2.如权利要求1所述的基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，其特征在于：所述步骤一中，蛋白酶K浓度为20-100ug/mL。

3.如权利要求1所述的基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，其特征在于：所述步骤二中，Carrier RNA浓度为1-8ug/mL。

4.如权利要求1所述的基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，其特征在于：所述结合缓冲液中Tris-HCl的pH值为6.0-7.0。

5.如权利要求1所述的基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，其特征在于：所述步骤一中，生物样本包括血清、血浆和组织液。