[发明专利]一种提高苹果愈伤镉敏感性的方法在审
| 申请号： | 202010101969.3 | 申请日： | 2020-02-19 |
| 公开（公告）号： | CN111349650A | 公开（公告）日： | 2020-06-30 |
| 发明（设计）人： | 张玮玮;岳松青;宋建飞;荀咪;杨洪强 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/74 |
| 代理公司： | 济南格源知识产权代理有限公司 37306 | 代理人： | 韩洪淼 |
| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 苹果 愈伤镉 敏感性 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种提高苹果愈伤镉敏感性的方法，其特征在于，将MhNRAMP6基因在苹果愈伤中超表达，MhNRAMP6基因的核苷酸序列如SEQ No.1所示。
2.根据权利要求1所述提高苹果愈伤镉敏感性的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)利用带有酶切位点的特异性引物进行PCR扩增pMD18-T-MhNRAMP6，产物与pROKII重组并构建了含MhNRAMP6基因的植物过表达载体pROKII-MhNRAMP6，转化农杆菌GV3101，获得带目的片段的表达载体的阳性菌株；特异性引物及酶切位点为：
F:CGGGAATGGCTGTGGCCAGTACGG，BamHI；
R：GGGGTAGGTCTACCGAAAATATCGA，KpnI；
(2)将阳性菌株浸染苹果愈伤，苹果愈伤再通过含有30mg/L的卡那霉素和250mg/L的头孢霉素的MS固体培养基培养，然后利用PCR技术获得MhNRAMP6基因超表达的苹果愈伤。
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