[发明专利]酶法合成D-对羟基苯甘氨酸结晶母液中D-对羟基苯甘氨酸的回收方法

说明书

本发明涉及酶法合成D‑对羟基苯甘氨酸结晶母液中D‑对羟基苯甘氨酸的回收方法。该方法包括如下步骤：(1)采用大孔吸附树脂吸附D‑对羟基苯甘氨酸；(2)从树脂上解析D‑对羟基苯甘氨酸；(3)从余液中回收氯化铵；(4)D‑对羟基苯甘氨酸结晶。本发明的方法工艺设计简便、可操作性强、回收效果好、产品质量优异，回收的D‑对羟基苯甘氨酸的纯度为99.2％以上，同时回收得到氯化铵。

技术领域

本发明属于制药技术领域，涉及酶法合成D-对羟基苯甘氨酸结晶母液中D-对羟基苯甘氨酸的回收方法。

背景技术

D-对羟基苯甘氨酸(p-hydroxylphenylglycine)，化学名D-α-氨基对羟基苯乙酸(简称D酸、D-HPG)，分子式(OH)C₆H₄CH(NH₂)COOH，分子量167.2。D-对羟基苯甘氨酸为白色片状结晶，溶点240℃(分解)，微溶于水、甲醇，易溶于酸或碱溶液生成盐。D-HPG是合成β-内酰胺类半合成广谱抗生素的重要医药中间体，主要用于合成青霉素和头孢菌素，例如：阿莫西林、头孢羟氨苄、头孢哌酮、头孢匹胺等。

D酸的生产工艺为对羟基苯海因在海因酶催化下生成对羟基苯甘氨酸，此工艺反应较完全，但结晶母液中D酸溶解度较大为18～30mg/mL，所以在分离出D酸晶体之后，如何回收母液中溶解的D酸对提高D酸的收率、降低成本起到决定性的作用。

中国专利CN102392060B公开了一种利用纳滤回收酶法阿莫西林母液中有效成分的方法，其包括如下步骤：(1)调节母液pH；(2)利用青霉素酰化酶水解母液中的阿莫西林，使母液中仅存在D-对羟基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸；(3)纳滤获得浓缩的母液；(4)等电结晶分离回收D-对羟基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸。该方法将母液水解液直接纳滤浓缩，不仅能耗大、浓缩倍数低，而且浓缩后的母液所含成分复杂，由此方法回收6-APA和D-对羟基苯甘氨酸效率低下，产品纯度差，例如根据其实施例，D-对羟基苯甘氨酸的纯度约95％。

因此，人们一直致力于探寻最佳的酶法合成D-对羟基苯甘氨酸结晶母液中D-对羟基苯甘氨酸的回收工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺设计简便、可操作性强、回收效果好、产品质量优异且适于产业化推广的酶法合成D-对羟基苯甘氨酸结晶母液中D-对羟基苯甘氨酸的回收方法。

根据本发明，本发明提供的酶法合成D-对羟基苯甘氨酸结晶母液中D-对羟基苯甘氨酸的回收方法，包括如下步骤：

(1)采用大孔吸附树脂吸附D-对羟基苯甘氨酸

使用盐酸将D-对羟基苯甘氨酸结晶母液的pH调节至1.5～2.5，而后流经大孔吸附树脂柱床，D-对羟基苯甘氨酸被树脂吸附，并在出口收集得到吸附余液；

(2)从树脂上解析D-对羟基苯甘氨酸

使用氨水将树脂中吸附的D-对羟基苯甘氨酸解析出来，得到D-对羟基苯甘氨酸解析液；

(3)从余液中回收氯化铵

对步骤(1)所得到的余液，通过蒸馏浓缩，而后冷却结晶，过滤、干燥，得到氯化铵固体；

(4)D-对羟基苯甘氨酸结晶

将步骤(2)所得到的解析液使用碱将其pH调节至9.0～9.5，而后采用纳滤膜进行纳滤浓缩，得到D-对羟基苯甘氨酸浓缩液；然后在35℃-45℃，用盐酸将该D-对羟基苯甘氨酸浓缩液的pH值调节至4.5～5.5,D-对羟基苯甘氨酸晶体逐渐析出，而后降温至5℃～10℃进行养晶，经过滤、干燥，得到D-对羟基苯甘氨酸晶体。

下面，更具体地说明本发明的酶法合成D-对羟基苯甘氨酸结晶母液中D-对羟基苯甘氨酸的回收方法。