[发明专利]利用乙酰氨基葡萄糖提高酵母抑制果实病害效力的方法

权利要求书

1.利用乙酰氨基葡萄糖提高酵母抑制果实病害效力所用的培养基，其特征在于：包括YEPD活化培养基、SM一级种子培养基和GlcNAc-SM二级种子培养基；

YEPD活化培养基为：蛋白胨20±0.5g、酵母粉10±0.5 g、葡萄糖20±0.5g、琼脂20 ±0.5g，加水定容至1000 mL，灭菌后，得YEPD活化培养基；

SM一级种子培养基为：葡萄糖10±0.5g、硫酸铵5±0.1g、磷酸氢二钾2±0.1g、硫酸镁3±0.1g、硫酸锌0.005g，加水定容至1000 mL，灭菌后，得SM一级种子培养基；

GlcNAc-SM二级种子培养基为：N-乙酰氨基葡萄糖1g加入水溶解后过0.22μm滤膜灭菌后所得液，再加入葡萄糖10±0.5g、硫酸铵5±0.1g、磷酸氢二钾2±0.1g、硫酸镁3±0.1g、硫酸锌0.005g，加水定容至1000 mL，灭菌后，得GlcNAc-SM二级种子培养基。

2.利用如权利要求1所述培养基制备提高酵母抑制果实病害效力的制剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）菌株活化

于28±1℃，海洋红冬孢酵母于YEPD活化培养基上静置培养30~48h，并在相同条件下重复传代培养一次；

所述海洋红冬孢酵母是保藏编号为IMI 394084的海洋红冬孢酵母Rhodosporidium paludigenum Fell Tallman；

（2）扩大培养

将步骤（1）所得的酵母以1%的接种量接种到SM一级种子培养基中，并在200±50rpm、28±1℃的培养条件下培养24±1h；之后以2%的接种量接种到GlcNAc-SM二级种子培养基中，在上述相同培养条件下培养24±1h；

（3）离心分离

将步骤（2）所得的菌液离心后水洗；用灭菌蒸馏水将酵母的浓度调至1×10⁷ 细胞/mL，得制剂。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤（3）为：

将步骤（2）所得的菌液以3000×g的速度离心5min，并用灭菌蒸馏水水洗三次从而去除培养基；利用血球板计数法计数并用灭菌蒸馏水将酵母的浓度调至1×10⁷ 细胞/mL，得到制剂。

4.如权利要求2或3所述方法制备而得的制剂的用途：用于防治梨果实青霉病害。