[发明专利]利用乙酰氨基葡萄糖提高酵母抑制果实病害效力的方法

说明书

本发明公开了利用乙酰氨基葡萄糖提高酵母抑制果实病害效力所用的培养基，包括YEPD活化培养基、SM一级种子培养基和GlcNAc‑SM二级种子培养基。本发明还同时提供了利用上述培养基制备提高酵母抑制果实病害效力的制剂的方法，包括以下步骤：菌株活化；扩大培养；离心分离，用灭菌蒸馏水将酵母的浓度调至1×10⁷细胞/mL，得制剂。本发明还同时提供了上述制剂的用途：用于防治梨果实青霉病害。

技术领域

本发明涉及的是果实采后病害防治技术领域，更具体的是一种通过N-乙酰-D-氨基葡萄糖提高海洋红冬孢酵母对梨果实病害防治效力的生物防腐保鲜技术。

背景技术

随着生活水平的提高，民众的膳食结构、消费观念都产生了明显的变化。对水果的产量和质量要求都在不断提高。同时，“绿色”、“有机”、“无公害”等标签也成为了消费者关注的点。

真菌病害是引起果蔬采后巨大损失的主要原因之一。其中果实的青霉病是最重要的病原真菌之一，而且扩展青霉还能产生真菌毒素，从而导致严重的食品安全问题。在越来越意识到化学制剂滥用会导致严重环境和健康问题的今天，利用拮抗酵母抑制果实采后真菌型病害，作为一种安全而且环境友好的新型生物防病保鲜技术，近年来受到了国内外广泛的关注。但是目前采后生防酵母的抑菌效力与化学杀菌剂相比仍有较大的差距，因此迫切需要进一步深入研究生防酵母抑制果实病害的机理，以进一步提高其抑菌效力。

中国发明授权专利《酶类降解棒曲霉素的方法》，专利号ZL201410065286.1，公开了一种基于海洋红冬孢酵母的酶类降解棒曲霉素的方法。中国发明授权专利《基于γ-氨基丁酸结合生防酵母的生物保鲜液及其用途》，专利号ZL 201410085393.0，公开了一种基于γ-氨基丁酸结合生防酵母的生物保鲜液，所述拮抗酵母包括红冬孢酵母Rhodosporidiumpaludigenum Fell and Tallman。中国申请专利《通过诱导抗性来抑制果实采后病害的方法及所用制剂》，申请号201610522546.2，公开了一种通过诱导抗性来抑制果实采后病害的制剂，该制剂是由海洋红冬孢酵母细胞壁和水组成。中国申请专利《含有生防酵母的用于控制柑橘采后病害的化学杀菌剂》，申请号201310224105.0，公开了一种含有生防酵母的用于控制柑橘采后病害的化学杀菌剂，所述生防酵母为红冬孢酵母Rhodosporidiumpaludigenum Fell and Tallman。中国申请专利《基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂》，申请号201110112540.5，公开了一种由红冬孢酵母悬浮液、赤霉素/激动素、水杨酸、生长素和水组成的柑橘生物保鲜剂。中国申请专利《用于果蔬采后病害生物防治的海洋酵母及其制备方法和用途》，申请号200610155062.5，公开了一种可以有效抑制链格孢、灰葡萄孢、扩展青霉、指状青霉、多毛孢等多种果蔬采后主要真菌病害的海洋红冬孢酵母。

上述涉及到的海洋红冬孢酵母Rhodosporidium paludigenum FellTallman是一株保藏于英国国际真菌研究所(International Mycological Institute)国际农业与生物中心基因资源保藏中心(CABI Genetic Resource Collection)的酵母，保藏号为IMI394084。从上述专利可以看出，红冬孢酵母具有较大的应用潜力，且已经有了研究者通过添加激发子对该拮抗酵母进行生理调控，从而达到扩大针对病原菌生防效力的目的。

N-乙酰-D-氨基葡萄糖(GlcNAc)是单糖葡萄糖的酰胺衍生物。它是介于葡萄糖胺和乙酸之间的一种二级酰胺。在许多生物系统中均有重要意义。是微生物细胞壁中的构成部分。此外，N-乙酰氨基葡萄糖还具有还原性，在体内具有许多重要的生理功能，例如抗炎，抗肿瘤和抗氧化剂。它可以减少软骨基质的破坏，是治疗骨关节炎和类风湿关节炎的有效药物。此外，N-乙酰氨基葡糖在食品，化学和化妆品工业中有广泛的应用，例如食品抗氧化剂，婴儿，幼儿食品添加剂和糖尿病甜味剂等。近年来国际上的研究表明，GlcNAc代谢在生物体，包括酵母等微生物中，除了作为结构分子外，还涉及重要的生理功能，特别是作为信号分子和营养(感受)分子的作用。