[发明专利]新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗原检测试剂盒

权利要求书

1.一种SARS-CoV-2抗原，其特征在于，所述抗原为由SEQ ID NO.2-SEQ ID NO.11中任一种所示氨基酸序列组成的蛋白质。

2.一种抗SARS-CoV-2的抗体，其特征在于，所述抗体特异性地与权利要求1所述的抗原结合。

3.根据权利要求2所述的抗体，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体。

4.一种权利要求2或3所述的抗体的制备方法，其特征在于，采用由SEQ ID NO.2-SEQID NO.11中任一种所示氨基酸序列组成的蛋白质作为抗原，与佐剂制备免疫原，免疫动物后得到抗体。

5.根据权利要求4所述的抗体的制备方法，其特征在于，采用由SEQ ID NO.2-SEQ IDNO.11中任一种所示氨基酸序列组成的蛋白质作为抗原，与佐剂制备免疫原，免疫动物后，待检测抗体效价满足10倍稀释活性在L6以上，再次免疫动物，然后取被免疫动物的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，筛选阳性克隆、扩增并纯化得到抗体；

优选地，所述动物为小鼠，优选为BALB/c小鼠；

优选地，佐剂包括弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂；

优选地，免疫动物的步骤包括：采用背部多点注射，利用抗原与弗氏完全佐剂制备的免疫原进行首次免疫，每间隔三周，利用抗原与弗氏不完全佐剂制备的免疫原进行第二次、第三次和第四次免疫；

优选地，首次免疫和再次免疫的抗原量均独立地为40-60μg；

优选地，第二次、第三次和第四次免疫的抗原量均独立地为20-30μg；

优选地，脾细胞与骨髓瘤细胞的细胞个数比例为1×10⁷-1×10⁹：1×10⁷；

优选地，细胞融合采用腹腔巨噬细胞作为饲养细胞；

优选地，阳性克隆的扩增采用腹水制备。

6.权利要求1所述的抗原或权利要求2或3所述的抗体在制备检测SARS-CoV-2抗原检测产品中的应用；

优选地，产品包括试纸或试剂盒。

7.一种利用双抗体夹心法检测SARS-CoV-2抗原的产品，其特征在于，所用抗体包括权利要求2或3所述的抗体。

8.一种SARS-CoV-2抗原的检测试纸，其特征在于，包括底板、样品垫、结合垫、包被膜和吸收垫，沿待测液体样本流动方向，样品垫、结合垫、包被膜和吸收垫依次固定于底板上；结合垫负载有金标蛋白，金标蛋白包括权利要求2或3所述的抗体；包被膜设有检测区和质控区，检测区负载有特异性抗体，质控区负载有羊抗鼠IgG抗体；所述特异性抗体为抗N蛋白特异性抗体、抗S蛋白特异性抗体、抗M蛋白特异性抗体或抗E蛋白特异性抗体；所述N蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述S蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述M蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述E蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示；

优选地，金标蛋白包括SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3分别制备的单克隆抗体；

优选地，特异性多抗为抗N蛋白特异性抗体；

优选地，待检测液体样本包括全血、血清或血浆；

优选地，胶体金的粒径为15-25nm；

优选地，结合垫上，每平方厘米结合垫上负载有0.8-1.5μg金标蛋白；

优选地，包被膜上，每厘米检测区上负载有1.5-2.5μg特异性抗体；

优选地，包被膜上，每厘米质控区上负载有1.0-1.5μg羊抗兔多抗；

优选地，样品垫经含有0.5-1.5v/v％Tween20、0.4-0.6w/v％PVA和0.1-0.2mg/ml抗RBC抗体的溶液浸泡处理。