[发明专利]一种硒单糖的酶催化检出方法

权利要求书

1.细胞色素P450单加氧酶、铁氧化还原蛋白、铁氧还蛋白还原酶和还原型四甲基联苯胺在检测硒单糖或制备硒单糖检出试剂中的应用，所述硒单糖为1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述细胞色素P450单加氧酶由大肠杆菌(Escherichia coli)重组表达，源于NCBI序列号为WP_038530297.1的细菌Formosaagariphila，细胞色素P450单加氧酶代号为CYP236A20。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述CYP236A20、铁氧化还原蛋白、铁氧还蛋白还原酶和还原型四甲基联苯胺的浓度比为0.01～1.0:1.0～90.0:0.2～18.0:250～3000。

4.一种硒单糖的酶催化检出方法，所述硒单糖为1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺，其特征在于，包括以下步骤：

提供含有细胞色素P450单加氧酶、铁氧化还原蛋白和铁氧还蛋白还原酶的待测溶液；

向待测溶液中加入还原型四甲基联苯胺溶液，根据待测溶液的颜色变化判断待测溶液中是否含有所述硒单糖。

5.根据权利要求4所述的检出方法，其特征在于：所述含有细胞色素P450单加氧酶来源于细菌Formosa agariphila，细菌Formosa agariphila的NCBI序列号为WP_038530297.1，代号CYP236A20；所述待测溶液中CYP236A20的浓度为0.01～1.0μM。

6.根据权利要求4所述的检出方法，其特征在于：所述待测溶液中铁氧化还原蛋白的浓度为1.0～90.0μM。

7.根据权利要求4所述的检出方法，其特征在于：所述待测溶液中铁氧还蛋白还原酶的浓度为0.2～18.0μM。

8.根据权利要求4所述的检出方法，其特征在于：所述待测溶液中还原型四甲基联苯胺的浓度为0.25～3.0mM。

9.根据权利要求4所述的检出方法，其特征在于：所述待测溶液的pH值为7.0～8.0。

10.一种1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺的指示剂，其特征在于，包括细胞色素P450单加氧酶、铁氧化还原蛋白、铁氧还蛋白还原酶和还原型四甲基联苯胺。