[发明专利]一种检测鲁西黑公羊胸深性状的DNA检测方法及其应用有效
申请号: | 202010108479.6 | 申请日: | 2020-02-21 |
公开(公告)号: | CN111118179B | 公开(公告)日: | 2022-02-25 |
发明(设计)人: | 宋恩亮;刘洪飞;姜富贵;蓝贤勇;成海建;张果平;魏晨;毛翠 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 房一粟 |
地址: | 250100 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 鲁西黑 公羊 性状 dna 方法 及其 应用 | ||
1.一种检测鲁西黑公羊胸深性状的DNA检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
以待测鲁西黑公羊全基因组DNA为模板,以引物对P1为扩增引物,利用PCR扩增包含绵羊IGF2BP1基因第4个内含子区域插入/缺失多态性位点的片段,对PCR扩增产物进行电泳,根据电泳结果进行判断,只有97bp带纹的为插入/插入基因型,即II基因型;只有88bp带纹的为缺失/缺失基因型,即DD基因型;两者都有的为插入/缺失基因型,即ID基因型;ID基因型的个体公羊胸深性状优于其他基因型个体;
所述插入/缺失多态性位点选自绵羊IGF2BP1基因NC_019468.1 :g.37072382-37072390位9-bp插入/缺失多态性位点,其中9-bp插入/缺失的序列如SEQ.ID.NO3所示;
所述引物对P1包括上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQ.ID.NO1所示,所述下游引物序列如SEQ.ID.NO2所示。
2.如权利要求1所述的DNA检测方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系如下所述:
PCR体系为13μL,包括2×Taq PCR SuperMix 6.5μL;上游引物0.5μL;下游引物0.5μL;基因组DNA 0.6μL;去离子水4.9μL。
3.如权利要求2所述的DNA检测方法,其特征在于,所述PCR扩增的PCR程序如下所述:
95 ℃预变性5 min;94 ℃变性30 s,60 ℃退火30 s,72 ℃延伸12 s,14个循环,每循环后退火温度减1 ℃;50 ℃退火30 s,72 ℃延伸12 s,34个循环;72 ℃延伸10 min。
4.如权利要求1-3任一项所述的检测鲁西黑公羊胸深性状的DNA检测方法在鲁西黑公羊分子标记辅助选择育种中的应用。
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