[发明专利]一种重组酿酒酵母及其在生产共轭亚油酸中应用有效
申请号: | 202010112022.2 | 申请日: | 2020-02-24 |
公开(公告)号: | CN113061541B | 公开(公告)日: | 2023-05-02 |
发明(设计)人: | 陈海琴;杨波;赵建新;李秀清;高鹤;张灏;陈卫 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/61;C12N9/90;C12P7/6431;C12R1/865 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 酿酒 酵母 及其 生产 共轭 油酸 应用 | ||
1.一种重组酿酒酵母,其特征在于,所述重组酿酒酵母以酿酒酵母为宿主表达氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的亚油酸异构酶。
2.如权利要求1所述的一种重组酿酒酵母,其特征在于,所述酿酒酵母为酿酒酵母INVSc1。
3.如权利要求1所述的一种重组酿酒酵母,其特征在于,编码所述亚油酸异构酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
4.如权利要求1-3任一所述的一种重组酿酒酵母,其特征在于,所述重组酿酒酵母以pYES2/NT C质粒为表达载体。
5.权利要求1-4任一所述重组酿酒酵母在生产共轭亚油酸方面的应用。
6.一种生产共轭亚油酸的方法,其特征在于,所述方法为先将权利要求1-4任一所述的重组酿酒酵母接种至发酵培养基中进行发酵,得到发酵液;将发酵液离心,收集菌体;将菌体破碎,收集含亚油酸异构酶的细胞破碎上清液;将含亚油酸异构酶的细胞破碎上清液添加至含亚油酸的反应体系中进行反应,得到反应液;将反应液进行分离,得到共轭亚油酸;
或者,所述方法为先将上述重组酿酒酵母接种至发酵培养基中进行发酵,得到发酵液;将发酵液离心,收集菌体;将菌体破碎,收集含亚油酸异构酶的细胞破碎上清液;将含亚油酸异构酶的细胞破碎上清液进行分离,得到亚油酸异构酶;将亚油酸异构酶添加至含亚油酸的反应体系中进行反应,得到反应液;将反应液进行分离,得到共轭亚油酸。
7.如权利要求6所述的一种生产共轭亚油酸的方法,其特征在于,所述发酵的温度为25~35℃、转速为150~250rpm。
8.如权利要求6或7所述的一种生产共轭亚油酸的方法,其特征在于,所述反应的温度为30~45℃、转速为150~250rpm。
9.权利要求1-4任一所述重组酿酒酵母在生产亚油酸异构酶方面的应用,其特征在于,所述亚油酸异构酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
10.一种生产亚油酸异构酶的方法,其特征在于,所述方法为先将权利要求1-4任一所述的重组酿酒酵母接种至发酵培养基中进行发酵,得到发酵液;将发酵液离心,收集菌体;将菌体破碎,收集细胞破碎上清液;将细胞破碎上清液进行分离,得到氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示的亚油酸异构酶。
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