[发明专利]一种外涂药物组合物、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种外涂药物组合物，包括金属硫蛋白，其特征在于，还包括与该金属硫蛋白联用的间充质干细胞无血清培养基上清。

2.根据权利要求1所述的外涂药物组合物，其特征在于，所述的间充质干细胞无血清培养基上清是粉状物或液体；所述的金属硫蛋白的浓度为19~21ppm。

3.一种如权利要求1所述外涂药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将间充质干细胞无血清培养基上清进行-20℃冷藏，得到目标冻干粉；将该目标冻干粉与浓度为19~21ppm的金属硫蛋白进行混合，得到最终药物组合物。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的间充质干细胞无血清培养基上清的制备过程如下：

S1.无菌环境下将人的脐带剪成1cm小段，得到小段的脐带；

S2.剥离S1步骤所述小段的脐带的动脉、静脉后，剪碎移入α-MEM完全培养基培养72 h，每隔2-3 d 更换一次培养液；

S3.待细胞达到80%融合度时，加入0.25 %胰蛋白酶消化传代，得到第3代的MSCs备用；

S4.将S3步骤备用的培养至第3代的MSCs采用无血清培养基培养48 h后，收集MSCs无血清培养上清，得到间充质干细胞无血清培养基上清。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：S2步骤中所述的α-MEM完全培养基的培养体系为：含10% PBS的α-MEM培养基中添加29~31mg/l 碱性成纤维细胞生长因子、49~51mg/l 表皮生长因子、4~6%体积分数的人血白蛋白、1.2~1.8mg/L 还原型谷胱甘肽、0.08~0.12mmol/L β-巯基乙醇、0.8~1.2%体积分数的SITE、8~12mg/L 氢化可的松、8~12nmol/L地塞米松和8~12nmol/L 氨基酸浓缩液。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于：所述的α-MEM完全培养基的最优培养体系为：含10% PBS的α-MEM培养基中添加30mg/l 碱性成纤维细胞生长因子、50 mg/l 表皮生长因子、5%体积分数的人血白蛋白、1.5mg/L 还原型谷胱甘肽、0.1mmol/L β-巯基乙醇、1%体积分数的SITE、10mg/L 氢化可的松、10nmol/L 地塞米松和10nmol/L 氨基酸浓缩液。

7.一种如权利要求1或2所述外涂药物组合物在抗应激性皮肤炎的制品中的应用。