[发明专利]一种磁珠法全血核酸提取裂解液、试剂盒及提取方法在审
申请号: | 202010120097.5 | 申请日: | 2020-02-26 |
公开(公告)号: | CN113308459A | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 邹涛;陈威;邱林 | 申请(专利权)人: | 重庆中元汇吉生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
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地址: | 400000 重庆市大渡口区*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磁珠法全血 核酸 提取 裂解 试剂盒 方法 | ||
1.一种磁珠法全血核酸提取裂解液,其特征在于,所述裂解液包括高浓度无机盐离子和高离序盐;所述裂解液pH为7以下。
2.根据权利要求1所述的裂解液,其特征在于,所述无机盐离子的浓度为1~4mol/L。
3.根据权利要求1或2所述的裂解液,其特征在于,所述高离序盐的浓度为2~6mol/L。
4.根据权利要求1-3中任意权利要求所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液pH为5-7。
5.根据权利要求1-4中任意权利要求所述的裂解液,其特征在于,所述无机盐离子选自氯化钾、醋酸钠或柠檬酸钠中的一种或多种。
6.根据权利要求1-5中任意权利要求所述的裂解液,其特征在于,所述高离序盐选自盐酸胍、LiCl、硫氰酸胍、硫氰酸钾或NaClO4中的一种或多种。
7.根据权利要求1-6中任意权利要求所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液还包括缓冲液,所述缓冲液选自HEPES、Tricine、醋酸钠-醋酸或Tris-HCl缓冲液。
8.根据权利要求1-7中所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液还包括表面活性剂,所述表面活性剂选自TRITON X-100、NP-40、tween20、tween 80、SDS或月桂醇聚醚的表面活性剂中的一种或多种。
9.一种含有权利要求1-8任意权利要求所述裂解液的试剂盒.。
10.一种磁珠法全血核酸的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)混合如权利要求1-8任意权利要求所述裂解液、样本、蛋白酶K和磁珠溶液,进行裂解提取;
(2)用洗涤液洗涤,吸磁,去上清液;
(3)加洗脱液进行洗脱。
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