[发明专利]一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法在审
| 申请号： | 202010121753.3 | 申请日： | 2020-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN111089959A | 公开（公告）日： | 2020-05-01 |
| 发明（设计）人： | 郝力力;郭莉;袁东波;阳爱国 | 申请（专利权）人： | 西南民族大学;四川省动物疫病预防控制中心 |
| 主分类号： | G01N33/545 | 分类号： | G01N33/545;G01N33/531;G01N21/76 |
| 代理公司： | 成都天汇致远知识产权代理事务所(普通合伙) 51264 | 代理人： | 韩晓银 |
| 地址： | 610041 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 日本 血吸虫 可溶性 虫卵 抗原 组分 分离 鉴定 方法 | ||
1.一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1，样品制备：将
步骤2，样品分离：将步骤1制备的上清液过葡聚糖凝胶柱，然后收集分离得到的抗原组分，-20℃保存备用；
步骤3，样品鉴定：将收集的抗原组分在PVDF膜上点样，1μg/点，室温放置1小时，然后将膜置于1%BSA(W/V)的PBST中4℃过夜封闭，PBST洗膜3次，每次5min，再与1:100倍稀释的
2.根据权利要求1所述的一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法，其特征在于：所述超声裂解的条件为：超声功率为400-500W，时间为10-30min。
3.根据权利要求1所述的一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法，其特征在于：所述葡聚糖凝胶柱的制备方法为：称取3g葡聚糖凝胶G-200至烧杯中，加入去离子水300ml，室温过夜溶胀，次日更换去离子水，沸水浴1小时，冷却后装柱，然后用pH4.0-5.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液平衡过夜。
4.根据权利要求3所述的一种日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离鉴定方法，其特征在于：所述将步骤1制备的上清液过葡聚糖凝胶柱，具体操作为：向葡聚糖凝胶柱内分多次加入步骤1制备的上清液，每次加入量为柱体积的5%，用pH4.9的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液洗脱抗原，流速为0.25ml/min。
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