[发明专利]一种肠道厌氧微生物培养瓶及其制备方法有效

专利信息
申请号: 202010121809.5 申请日: 2020-02-26
公开(公告)号: CN111363671B 公开(公告)日: 2023-07-21
发明(设计)人: 周开臣;杨柳;王荃;姚智 申请(专利权)人: 天津医科大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12M1/24;C12N1/04
代理公司: 天津才智专利商标代理有限公司 12108 代理人: 王梦
地址: 300070 *** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一种 肠道 厌氧微生物 培养 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种肠道厌氧微生物培养瓶,其特征在于,包括密封封装的培养瓶和灌装在培养瓶内的培养液;其中,培养液包括由以体积份计的100份基础培养基水溶液、4份2.5wt.%的L-半胱氨酸盐水溶液和0.1份0.1wt.%的刃天青水溶液混合得到的基础培养液,以及体积份数为基础培养液的4%的活性添加剂混合液配制而成;活性添加剂混合液由以体积份计的10份1640培基液、1份BI血清、1份维生素K和1份氯化血红素混合而成;其中,基础培养基为粉末状的RAM基础培养基、CDC基础培养基、RCM基础培养基或MRS基础培养基。

2.根据权利要求1所述的肠道厌氧微生物培养瓶,其特征在于,培养液的灌装体积为培养瓶容积的90%~95%。

3.根据权利要求1所述的肠道厌氧微生物培养瓶,其特征在于,培养瓶由西林瓶、插装在西林瓶瓶口处的橡胶胶塞、封装在橡胶胶塞和西林瓶瓶口端部的中空铝盖、以及盖装在中空铝盖上的顶盖。

4.根据权利要求1所述的肠道厌氧微生物培养瓶,其特征在于,西林瓶采用硼硅玻璃瓶;顶盖采用聚四氟乙烯顶盖。

5.一种肠道厌氧微生物培养瓶的制备方法,其特征在于,制备方法如下:

S1、将粉末状的基础培养基按比例溶解在无菌水中配制得到基础培养基溶液;将粉末状刃天青溶解在无菌水中配制得到0.1wt.%的刃天青水溶液;将粉末状L-半胱氨酸盐溶解在无菌水中配制得到2.5wt.%的L-半胱氨酸盐水溶液;

S2、将基础培养基溶液、L-半胱氨酸盐水溶液和刃天青水溶液按照体积比为1000:40:1混合得到基础培养液,分别灌装至若干个培养瓶中,并将完成灌装的培养瓶进行密封封装;其中,灌装体积为培养瓶容积的90%~95%;

S3、对经过步骤S2完成灌装和密封的培养瓶进行高压灭菌;

S4、将1640培基液、BI血清、维生素K和氯化血红素按照10:1:1:1的体积比混合配制得到活性添加剂混合液,待经过步骤S4高压灭菌后的培养瓶的温度降至室温后,在无菌操作台中将活性添加剂混合液通过注射器注入至培养瓶内;

活性添加剂混合液的注入量与基础培养液的体积比为1:25。

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