[发明专利]HBV检测试剂盒及其使用方法和应用有效
| 申请号： | 202010122229.8 | 申请日： | 2020-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN111118222B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 吴燕;邓京;欧格;勾宏娜 | 申请（专利权）人： | 珠海丽珠试剂股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京超成律师事务所 11646 | 代理人： | 高玉光 |
| 地址： | 519000 广东省珠海市香*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hbv 检测 试剂盒 及其 使用方法 应用 | ||
1.一种HBV检测试剂盒，其特征在于，所述HBV检测试剂盒包括核酸扩增试剂和样本处理液；
所述核酸扩增试剂包括：酶、dNTPs、金属阳离子、蛋白保护剂、HBV特异性引物、HBV特异性探针和缓冲体系；
所述核酸扩增试剂为冻干粉试剂；所述蛋白保护剂为甘露醇和蔗糖，所述甘露醇的浓度为0.7%-1.5% W/V，所述蔗糖的浓度为10.5%-16% W/V；
所述样本处理液由0.03% W/V SDS、0.06% V/V Triton X-100和0.02% V/V Tween80，以及0.04%-0.07% W/V二甲基亚砜和5%-9% W/V乳糖组成。
2.根据权利要求1所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述酶包括DNA聚合酶和UNG酶。
3.根据权利要求2所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶为热启动Taq酶。
4.根据权利要求3所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述热启动Taq酶的浓度为3-10U/反应。
5.根据权利要求4所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述热启动Taq酶的浓度为5-8U/反应。
6.根据权利要求2所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述UNG酶的浓度为0.3-1U/反应。
7.根据权利要求6所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述UNG酶的浓度为0.5-0.8U/反应。
8.根据权利要求1所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述dNTPs包括dATP、dCTP、dGTP和dUTP。
9.根据权利要求8所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述dATP、dCTP和dGTP的浓度均独立地为200-300μM。
10.根据权利要求8所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述dUTP的浓度为350-450μM。
11.根据权利要求1所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述金属阳离子包括镁离子和钾离子。
12.根据权利要求11所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述镁离子的浓度为1-10mM。
13.根据权利要求12所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述镁离子的浓度为3-6mM。
14.根据权利要求11所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述钾离子的浓度为45-55mM。
15.根据权利要求14所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述钾离子的浓度为50mM。
16.根据权利要求1所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲体系包括pH为7.8-8.6的缓冲体系。
17.根据权利要求16所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲体系包括Tris-HCl缓冲体系。
18.根据权利要求17所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述Tris-HCl缓冲体系的浓度为10-30mM。
19.根据权利要求18所述的HBV检测试剂盒，其特征在于，所述Tris-HCl缓冲体系的浓度为20mM。
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