[发明专利]一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法及在白介素6检测中的应用

权利要求书

1.一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法，其特征在于，将抗体与荧光微球偶联得到抗体-荧光微球偶联物，将抗体-荧光微球偶联物再次与荧光微球偶联，得到增强型抗体-荧光微球偶联物。

2.一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法在白介素6检测中的应用，其特征在于，标记物的制备方法如下：

(1)将抗IL-6单克隆抗体与荧光微球偶联，得到IL-6抗体-荧光微球偶联物；

(2)将IL-6抗体-荧光微球偶联物再次与荧光微球偶联，得到增强型IL-6抗体-荧光微球偶联物。

3.根据权利要求2所述的一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法在白介素6检测中的应用，其特征在于，步骤(1)中，IL-6抗体-荧光微球偶联物的制备方法如下：

(11)取出荧光微球放入离心管中离心，沉降、去除上清；

(12)向沉降物中加入偶联缓冲液，混匀，然后加入EDC溶液、sulfo-NHS溶液混匀、孵育；

(13)将步骤(12)的溶液离心，沉降、去除上清，再加入偶联缓冲液混匀；

(14)加入抗IL-6单克隆抗体，混匀，室温下用孵育，得到IL-6抗体-荧光微球偶联物。

4.根据权利要求3所述的一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法在白介素6检测中的应用，其特征在于，步骤(2)中，增强型IL-6抗体-荧光微球偶联物的制备方法如下：

(21)重复步骤(11)、(12)，处理后的荧光微球与已经偶联孵育完成的IL-6抗体-荧光微球偶联物等比例混合，室温下孵育；

(22)孵育完毕后离心，沉降、去除上清，然后加入封闭液混匀，孵育；

(23)最后离心、沉降、去除上清，加入保存液混匀。

5.根据权利要求2所述的一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法在白介素6检测中的应用，其特征在于，白介素6检测在荧光层析检测试纸条上进行，荧光层析检测试纸条包括基板和基板上依次衔接的样品垫、标记物垫、层析膜和吸水垫，所述标记物垫为玻纤垫，所述层析膜为硝酸纤维素膜。

6.根据权利要求5所述的一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法在白介素6检测中的应用，其特征在于，所述玻纤垫经过如下处理：

将处理液喷涂于玻纤垫一侧，然后将增强型IL-6抗体-荧光微球偶联物和兔IgG-荧光微球偶联物的混合液喷涂于玻纤另一侧，37℃烘干。

7.根据权利要求6所述的一种提升免疫层析标记物灵敏度的方法在白介素6检测中的应用，其特征在于，所述硝酸纤维素膜经过如下处理：将另一种抗IL-6抗体，使用稀释液稀释至1mg/mL，划线于硝酸纤维素膜上一侧作为检测线；将羊抗兔IgG使用稀释液稀释至0.5mg/mL，划线于硝酸纤维素膜上作为质控线，37℃烘干24h。