[发明专利]一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取试剂及提取方法在审
申请号: | 202010126150.2 | 申请日: | 2020-02-28 |
公开(公告)号: | CN111235091A | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
发明(设计)人: | 湛振键;邱伟勤;齐国光 | 申请(专利权)人: | 海口健康岛生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;A61K35/35;A61P19/02;A61P19/08 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 陈欢 |
地址: | 571157 海南省海口市秀*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 血管 基质 成分 svf 提取 试剂 方法 | ||
1.一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取试剂,其特征在于:所述提取试剂包括以下原料:胶原酶、海藻糖及明胶。
2.如权利要求1所述的一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取试剂,其特征在于:所述提取试剂包括以下原料:0.1-1w/w%胶原酶溶液、2-10w/w%的海藻糖溶液及0.05-0.15w/w%的明胶溶液。
3.如权利要求2所述的一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取试剂,其特征在于:所述提取试剂由胶原酶溶液、海藻糖溶液、明胶溶液体积比为0.8-1.2:0.8-1.2:0.8-1.2。
4.如权利要求1所述的一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、采集脂肪组织,用pH值为7.2-7.4的PBS清洗2-4遍;
S2、清洗后的脂肪组织去除洗涤液,加入权利要求书1~3任一项所述的提取试剂,在30~40℃振荡消化30-60min,离心后弃除上层消化液、油脂及红细胞;
S3、加入生理盐水洗涤沉淀细胞,900~1400rpm离心2~8min去除上清,沉淀加入8~12倍体积量的生理盐水重悬细胞,80~120μm过滤SVF细胞;
S4、SVF再次离心,8~12倍体积量生理盐水重悬细胞,用20~60μm滤器过滤细胞,得到SVF细胞。
5.如权利要求4所述的一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取方法,其特征在于:所述S2步骤的振荡频率为150-280rpm。
6.如权利要求4所述的一种人自体脂肪血管基质成分SVF的提取方法,其特征在于:所述S3步骤加入5~10倍体积的生理盐水洗涤沉淀细胞。
7.如权利要求1~6所述的一种人自体脂肪血管基质成分SVF,其特征在于:应用于现有临床治疗技术对骨关节炎、关节软骨缺损、软骨损伤与退变等疾病治疗。
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