[发明专利]核酸的标记方法在审
申请号: | 202010129157.X | 申请日: | 2020-02-28 |
公开(公告)号: | CN111748550A | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 佐佐木茂贵;谷口阳佑;原田额郎 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人九州大学;株式会社久留米研究园地 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京青松知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11384 | 代理人: | 郑青松 |
地址: | 日本福冈*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 标记 方法 | ||
1.一种核酸的标记方法,其特征在于,包括以下步骤:
反应步骤,将核酸探针杂交至标记对象的核酸,其中,所述核酸探针具有与标记对象的核酸互补的碱基序列,并且在与所述标记对象的核酸的成为标记靶的靶碱基互补的位置导入有反应性碱基衍生物;
转移步骤,将包含在所述反应性碱基衍生物的转移基团转移至所述标记对象的核酸的包含所述靶碱基的核苷酸残基;以及
标记步骤,用放射性物质对转移至所述核苷酸残基的所述转移基团进行标记。
2.根据权利要求1所述的核酸的标记方法,其特征在于,
所述转移基团是吡啶酮类转移基团,
在所述转移步骤中,将所述吡啶酮类转移基团转移至作为所述靶碱基的胞嘧啶碱基或腺嘌呤碱基。
3.根据权利要求1或2所述的核酸的标记方法,其特征在于,
所述转移基团是二酮类转移基团,
在所述转移步骤中,将所述二酮类转移基团转移至作为所述靶碱基的鸟嘌呤碱基。
4.根据权利要求1或2所述的核酸的标记方法,其特征在于,
所述转移基团是乙酰基,
在所述转移步骤中,将乙酰基转移至包含作为靶碱基的尿嘧啶碱基的核苷酸残基的核糖的2'位。
5.根据权利要求1或2所述的核酸的标记方法,其特征在于,还包括以下步骤:
第一步骤,将核酸探针杂交至所述标记对象的核酸,其中,所述核酸探针具有与所述标记对象的核酸互补的碱基序列,并且在与所述靶碱基在所述标记对象的核酸的位置不同的碱基互补的位置导入有反应性碱基衍生物;
第二步骤,将在所述第一步骤中杂交至所述标记对象的核酸的所述核酸探针的所述反应性碱基衍生物包含的转移基团转移至所述标记对象的核酸的包含所述不同的碱基的核苷酸残基;以及
第三步骤,用与所述标记步骤的所述放射性物质不同种类的放射性物质对转移至包含所述不同的碱基的核苷酸残基的所述转移基团进行标记。
6.根据权利要求1或2所述的核酸的标记方法,其特征在于,
所述放射性物质,是氚。
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