[发明专利]一种用于生物标志物检测的试剂盒及其制备方法和应用在审
申请号: | 202010132321.2 | 申请日: | 2020-02-29 |
公开(公告)号: | CN111273031A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 张顺平;熊洋;徐红星 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/53 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 李炜 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 生物 标志 检测 试剂盒 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备生物芯片:
以载玻片为载体,在载玻片上依次镀铬膜和金膜,再在金膜上修饰待检测生物标志物对应的抗体;
(2)制备纳米标签:
将待检测生物标志物对应的抗体和纳米金颗粒水溶液混合即得。
2.根据权利要求1所述的用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中镀膜的方法为蒸镀,蒸镀的蒸发速率独立为0.04~0.06nm/s,蒸镀时间独立为90~110s,蒸镀温度独立为20~30℃。
3.根据权利要求1所述的用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中铬膜的厚度为4~6nm。
4.根据权利要求1所述的用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中金膜的厚度为45~55nm。
5.根据权利要求1所述的用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于:所述生物标志物包括免疫球蛋白;所述对应的抗体为免疫球蛋白抗体。
6.根据权利要求1所述的用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中在金膜上修饰待检测生物标志物对应的抗体的方法为:在金膜表面滴加16-巯基十六烷基酸,静置0.8~1.2h后,用去离子水冲洗,然后滴加抗体,静置0.8~1.2h。
7.根据权利要求1所述的用于生物标志物检测的试剂盒的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中纳米金颗粒水溶液中纳米金颗粒的浓度为0.02~0.04nM;所述纳米金颗粒的粒径为50~70nm。
8.一种用于生物标志物检测的试剂盒,其特征在于:采用权利要求1~7任一项所述的方法制备。
9.一种权利要求8所述的用于生物标志物检测的试剂盒的应用方法,包括以下步骤:在生物芯片表面滴加待检测生物标志物,静置0.8~1.2h后,用去离子水冲洗,滴加纳米标签,静置0.8~1.2h后用去离子水冲洗,干燥,进行镜检。
10.根据权利要求9所述的用于生物标志物检测的试剂盒的应用方法,其特征在于:所述镜检于暗场显微物镜下进行,物镜倍数为100×。
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