[发明专利]一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法

权利要求书

1.一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、采集水样，对水样进行预处理；

S2、对步骤S1中预处理后的水样经过固相萃取进行富集和提纯，得到样品A；

S3、对步骤S2中得到的样品A进行柱前衍生处理，得到样品B；

S4、对步骤S3中得到的样品B进行液液萃取，得到最终样品C；

S5、将步骤S4中得到的样品C经过高效液相色谱进行分析，所述高效液相色谱的液相色谱分离流动相由0.1mmol/L乙酸铵和乙腈组成，最终检测出水样中游离氨基酸的浓度；

S6、制备游离氨基酸的标准溶液，经过所述高效液相色谱的分析，最终检测出标准溶液中游离氨基酸的浓度，用于步骤S5中检测出游离氨基酸浓度的验证。

2.根据权利要求1所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述步骤S1中的预处理包括如下步骤：水样经过0.45μm玻璃纤维膜进行过滤，并用盐酸将pH调至1.3，得到预处理后的水样。

3.根据权利要求1所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述步骤S2中的固相萃取由串联的C18小柱作为除杂柱与SCX弱阴离子交换小柱进行富集和提纯。

4.根据权利要求1所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述步骤S3中的柱前衍生处理包括如下步骤：分别向样品A中加入100μL衍生试剂A和100μL衍生试剂B，所述衍生试剂A由乙腈和乙三胺组成，所述衍生试剂B由乙腈和苯异硫氰酸酯组成；加入后涡旋振荡20s后于25℃静置反应40min，得到样品B。

5.根据权利要求4所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述乙腈和乙三胺的体积质量比为43:7。

6.根据权利要求4所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述乙腈和苯异硫氰酸酯的体积质量比为247:3。

7.根据权利要求1所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述S4中的液液萃取操作包括如下步骤：

步骤1：分别向样品B中加入1.0ml纯水和0.4ml正己烷，振荡1min后静置完全分层，取出上层有机溶液；

步骤2：取出步骤1中的上层有机溶液后加入0.4ml正己烷，再次萃取出上层有机相，下层水相经亲水性聚四氟乙烯滤膜过滤，得到最终样品C。

8.根据权利要求1所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述标准溶液由0.1mol/L盐酸和1g/L游离氨基酸组成。

9.根据权利要求1所述的一种水源水中多种游离氨基酸同时检测的固相萃取-液相检测方法，其特征在于，所述游离氨基酸包括天冬氨酸，谷氨酸，丝氨酸，组氨酸，丙氨酸，脯氨酸，酪氨酸，缬氨酸，甲硫氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，苯丙氨酸和赖氨酸。