[发明专利]一种树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法在审
申请号: | 202010137681.1 | 申请日: | 2020-03-02 |
公开(公告)号: | CN111226865A | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
发明(设计)人: | 吴敏;代解杰;刘晓晨;罕圆圆 | 申请(专利权)人: | 云南省第二人民医院 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 于洪;陈左 |
地址: | 650021 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种树 脉络 新生 血管 动物 模型 构建 方法 | ||
1.一种树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
所有实验树鼩均为成年健康树鼩,年龄在2-3岁之间,体重150~200g,均在造模前,进行裂隙灯和双目间接检眼镜检查,排除眼部疾病;
腹腔内注射戊巴比妥钠深度麻醉动物后,维持麻醉后维持动物体温;激光光凝前25~30min,用复方托吡卡胺滴眼液滴眼以充分散大双眼瞳孔;接着进行双眼点表面麻醉,之后,用卡波姆眼用凝胶滴眼以预防角膜干燥,最后固定动物;
扒开实验动物上下眼睑,将一片盖玻片正中央涂上卡波姆眼用凝胶后盖在树鼩角膜中央;在距视盘1PD的距离,将眼底均等划分为围绕视盘的N个区域,每个区域包含60°范围视网膜;于每个区域中心,避开血管,等距离行氪离子激光光凝,每个区域1个激光斑,击破Bruch膜;N个激光点距离视盘的距离相等,N个激光点之间的距离也相等;N=6~10;
分别于光凝前及光凝后3、7、14、21、28天,观察造模后FFA/ICGA的特征,当FFA/ICGA均出现CNV典型表现,即视为建模成功。
2.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,在造模前,深度麻醉后,进行裂隙灯和双目间接检眼镜检查。
3.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,腹腔内注射戊巴比妥钠深度麻醉动物时,麻醉剂量为4.5mg/kg。
4.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,维持麻醉后动物体温的方式为:采用加热垫维持麻醉后动物体温。
5.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,用复方托吡卡胺滴眼液滴眼时,滴眼三次,每次1~2滴,相邻两次间隔5min。
6.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,双眼点表面麻醉时,采用盐酸奥布卡因滴眼液,滴眼两次,每次1~2滴,两次间隔2min。
7.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,用卡波姆眼用凝胶滴眼一次,用量1~2滴。
8.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,激光波长为647.1nm,光凝斑直径50μm,曝光时间0.01s,能量从250mw开始,在周边视网膜上进行能量的滴定根据视网膜的反应,调节能量大小,以光凝后有气泡形成无视网膜出血,标志击破Bruch膜,记为有效点。
9.根据权利要求8所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,如击破小血管时,有出血,该眼不用于建模。
10.根据权利要求1所述的树鼩脉络膜新生血管动物模型的构建方法,其特征在于,所述的CNV典型表现为:在造影的早期出现激光病灶处染料渗漏,随着时间延长渗漏面积不断扩大。
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