[发明专利]一种新型冠状病毒的试剂盒及其单独闭管一步法检测新型冠状病毒核酸的方法

权利要求书

1.一种单独闭管一步法检测新型冠状病毒核酸的试剂盒，包括引物、挂锁探针和RCA标准品，其特征在于：所述的RCA标准品具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；所述的挂锁探针具有SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；所述引物具有SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的单独闭管一步法检测新型冠状病毒核酸的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒包括：引物、挂锁探针、RCA标准品、T4 DNA连接酶、Phi29 DNA聚合酶、RCA缓冲液、dNTP、Hemin和显色液，显色液包括TMB和H₂O₂。

3.一种由2019-CoV RNA驱动的单独闭管一步法检测新型冠状病毒核酸的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)一个用于等温扩增的磷酸化的线性挂锁探针，探针的两端可被2019-CoV RNA的保守序列(即RCA标准品)特异性识别并结合；

(2)当样品中有靶标2019-CoV RNA存在时，挂锁探针与靶标的保守序列特异性杂交，此时溶液中的T4 DNA连接酶将该线性探针连接成环状模板；

(3)以该环状DNA为模板，发生RCA的高效扩增反应，产生富含大量G4链体的长纳米线，在Hemin的触发下形成Hemin/G4链体拟酶，具有拟酶作用的Hemin/G4链体催化TMB与H₂O₂溶液的氧化还原反应，进而发生肉眼可辨的颜色变化。

4.权利要求1-3任一项所述的单独闭管一步法检测新型冠状病毒核酸的试剂盒在检测新型冠状病毒肺炎病中的应用。