[发明专利]一种基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒及其制备使用方法

权利要求书

1.一种基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2；

所述试剂R1包括的成分及相应含量为：缓冲液5-10g/L，S-腺苷甲硫氨酸5-15g/L，NADH10-30g/L，三(2-羧乙基)膦氯化氢10-25g/L，防腐剂1-3mL/L，稳定剂3-14g/L，表面活性剂0.5-2.5mL/L，溶剂为纯化水；

所述试剂R2包括的成分及相应含量为：缓冲液2-10g/L，无机盐5-15g/L，S-腺苷同型半胱氨酸水解酶2-8.5g/L，a-酮戊二酸5-10g/L，谷氨酸脱氢酶2-11g/L，HCY甲基转移酶0.5-5g/L，腺苷脱氨酶0.5-1.5g/L，防腐剂1-3mL/L，稳定剂20-46g/L，表面活性剂1-7mL/L，溶剂为纯化水。

2.根据权利要求1所述的基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒，其特征在于，在所述试剂R1中：

所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种；

所述防腐剂为Proclin300、庆大霉素和硫柳汞中的一种；

所述稳定剂为BSA、甘氨酸和蔗糖中的一种；

所述表面活性剂为吐温-20、吐温-80、曲拉通X-100中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的pH为6.1-6.6。

4.根据权利要求1所述的基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒，其特征在于，在所述试剂R2中：

所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种；

所述无机盐为氯化钠、氯化镁、氯化钾、氯化锌、氯化钙中的一种或多种；

所述防腐剂为Proclin300、庆大霉素和硫柳汞中的一种；

所述稳定剂为BSA、甘氨酸和蔗糖中的一种；

所述表面活性剂为吐温-20、吐温-80、曲拉通X-100中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒，其特征在于，所述试剂R2的pH为6.5-7.7。

6.一种如权利要求1-5任一所述的基于胶乳增强免疫比浊法测定HCY的试剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配制试剂R1：

按照试剂R1的组分含量称取各原料，并置于装有0.7L纯化水的烧杯中，依次称取溶解，搅拌均匀；然后，将pH调节到目标值；最后，将溶液转移到容量瓶中定溶至1L，再用0.22um滤膜过滤，贴上标签，置于2-8℃保存；

(2)配制试剂R2：

按照试剂R2的组分含量称取各原料，并置于装有0.7L纯化水的烧杯中，依次称取溶解，搅拌均匀；然后，将pH调节到目标值；最后，将溶液转移到容量瓶中定溶至1L，再用0.22um滤膜过滤，贴上标签，置于2-8℃保存。

7.一种如权利要求1-5任一所述的基于循环酶速率法测定HCY的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下具体步骤：

(1)吸取13μL样本，加入240μL试剂R1，37℃孵育3-5min；

(2)再加入60μL试剂R2，混匀；

(3)37℃孵育180s，在主波长340nm/副波长405nm下连续监测2分钟吸光度变化，计算△A/min，根据ΔA测算样本中HCY含量。