[发明专利]一体化分子诊断系统及其在追溯β冠状病毒动物来源的应用

权利要求书

1.一种用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于包括如下各组：

(1) 针对β冠状病毒A谱系引物和探针，其引物对序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示，探针序列为SEQ ID NO.3所示；

(2) 针对β冠状病毒B谱系引物和探针，其引物对序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ IDNO.5所示，探针序列为SEQ ID NO.6所示；

(3) 针对β冠状病毒C谱系引物和探针，其引物对序列分别如SEQ ID NO.7和SEQ IDNO.8所示，探针序列为SEQ ID NO.9所示；

(4) 针对β冠状病毒C谱系MERS引物和探针，其引物对序列分别如SEQ ID NO.10和SEQID NO.11所示，探针序列为SEQ ID NO.12所示；或

(5) 针对β冠状病毒D谱系引物和探针，其引物对序列分别如SEQ ID NO.13和SEQ IDNO.14所示，探针序列为SEQ ID NO.15所示。

2.如权利要求1所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于：对探针的两端进行荧光修饰。

3.如权利要求2所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于：对探针的5’端用CY5修饰，3’端用BHQ2修饰。

4.如权利要求1所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于：还包括针对18S rRNA序列作为内参基因的引物和探针。

5.如权利要求3所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于，针对内参基因的引物对序列分别如SEQ ID NO.16和SEQ ID NO.17所示，针对内参基因的探针序列为SEQ ID NO.18所示，且对探针的两端进行荧光标记修饰。

6.如权利要求5所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于，针对内参基因的探针的5’端用ROX修饰，3’端用BHQ2修饰。

7.如权利要求1所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于，还包括公认的检测SARS-CoV-2的引物组和探针组合，其引物如SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20所示，探针如SEQ ID NO.21所示，和/或引物如SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.23所示，探针如SEQ IDNO.24；且对探针的两端进行荧光标记修饰。

8.如权利要求7所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合，其特征在于，对公认的检测SARS-CoV-2的探针的5’端用FAM修饰，3’端用BHQ1或TAMRA修饰。

9.一种检测动物中β冠状病毒的试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1至8所述的用于检测β冠状病毒的引物和探针组合各组引物和探针组合单独包装或混和包装。

10.如权利要求9所述的β冠状病毒的试剂盒，其特征在于，各组引物和探针以预混液包装的形式。

11.如权利要求9所述的β冠状病毒的试剂盒，其特征在于，预混液包括Mn²⁺ 2.5mM。